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主题：【讨论】氨基葡萄糖的衍生问题

浏览0 回复13 电梯直达
wayz193476
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发表于：2010/03/23 15:12:19 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问一下，谁有做过用OPA(邻苯二甲醛）作为衍生剂来衍生氨基葡萄糖，如果做过的话，还请高人指点一下反应的条件，譬如温度，溶剂等等；在我所查的一篇文献中方法如下，将OPA和硼酸盐缓冲液和3-巯基丙酸按一定比例混合，先制成衍生剂，然后再和氨基葡萄糖溶液混合反应。我的问题是: 3-巯基丙酸的作用是什么；2 衍生剂和氨基葡萄糖溶液混合反应，具体条件是什么，
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2010/3/23 19:13:58 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这里有一个类似的参考文献可以看一下：
http://www.doc88.com/p-4510210929.html
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柏坡
hgycook
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2010/3/23 22:46:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般关于OPA衍生化测定氨基酸的实验，很少涉及衍生试剂的反应变化，这方面您可以咨询提供方法和试剂的供应商，他们会给出准确的答案。
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wayz193476
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2010/3/23 23:17:04 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢关心，今天按照外国文献的方法做了，不理想，很郁闷，，，，
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有水有渝
xky0230699
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2010/3/24 8:02:30 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
找一找就按氨基酸的衍生条件试一下，好像是加温60度反应（太久没有做忘了），反应时间忘了.
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柏坡
hgycook
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2010/3/24 22:19:56 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是衍生不彻底还是分离度不好？多种氨基酸的分离效果并不那么理想。
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tiantan456
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2010/3/25 13:38:33 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个试剂衍生反应速度很快的，比丹酰氯快多了，可搞成inline的。
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wayz193476
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2010/3/25 15:47:23 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我现在测是的标准品，经过衍生后，出峰了；但为了确定衍生的成功，又同时测了未衍生的氨基葡萄糖和衍生剂OPA（邻苯二甲醛），氨基葡萄糖没有峰，但OPA（邻苯二甲醛）却在同样的位置出峰了，但峰高稍微低一些；之后我又进了一针衍生物峰高也更低了。我知道OPA很容易氧化，所以现在就不能说明我的衍生到底成不成功，但网上曾有人说OPA不能发射荧光，这就怪了，那我做的OPA怎么就出峰了呢，很纠结，，，，，
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老多_小多
emoc98311
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2010/3/25 15:56:31 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
邻苯二甲醛,带苯环，应该是有荧光
没有又怎么来衍生呢？
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wayz193476
wayz193476
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2010/3/26 10:22:28 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
道理是这样的，问题是很多文献都用OPA，水杨醛等作为荧光衍生剂，那么如果有的话，那是不是OPA的荧光弱，而衍生后荧光强呢，或者说荧光的发射波长不一样呢，超纠结，盼复..........
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老多_小多
emoc98311
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2010/3/26 10:26:04 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wayz193476(wayz193476) 发表:
道理是这样的，问题是很多文献都用OPA，水杨醛等作为荧光衍生剂，那么如果有的话，那是不是OPA的荧光弱，而衍生后荧光强呢，或者说荧光的发射波长不一样呢，超纠结，盼复..........

看你这个问题都不知道你是问OPA还是什么？
衍生是因为被测物没吸收，衍生后就有吸收了
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