主题:【已应助】【求助】请问我的色谱柱为什么用的时间如此短

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netsking
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原文由 风之彩(juju11) 发表:
你的水相是不是太脏了,看看有没有长菌?流动相多久更换一次,有没有过滤?滤头是否干净?你可以将滤头,管路,溶剂瓶都换成干净的,再看看。
我也曾遇到过,测试了一个月样品,除了每天冲洗柱子3个小时左右,其余时间都在进样,流动相每天都新配,做了半个月就出现压力升高、在线过滤器堵塞的现象,后来发现还是水相的滤头那里长菌了(因为有缓冲盐)。自己已经很小心了,还是长,可能是环境温度太适宜了。后来清洗过,就好了。自己再多关注下就好了。

请问一下, 你是如何清洗过虑头的?俺是用强酸超声后, 清水超声, MeOH:H2O=1:1再超声, 再用MeOH超声, 每次20分钟吗?这样可以清洗干净, 可是时间不长,又会堵塞.
论坛版主招募|新窦
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原文由 netsking(netsking) 发表:

请问一下, 你是如何清洗过虑头的?俺是用强酸超声后, 清水超声, MeOH:H2O=1:1再超声, 再用MeOH超声, 每次20分钟吗?这样可以清洗干净, 可是时间不长,又会堵塞.


你的清洗方法可以的。

用的时间不长又会堵塞?是水相的过滤头特别容易脏吗?你的水相一般几天更换一次的?每天是否有过滤了再使用?
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2010/4/17 11:37:51 Last edit by capinter
user007
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原文由 netsking(netsking) 发表:
原文由 风之彩(juju11) 发表:
你的水相是不是太脏了,看看有没有长菌?流动相多久更换一次,有没有过滤?滤头是否干净?你可以将滤头,管路,溶剂瓶都换成干净的,再看看。
我也曾遇到过,测试了一个月样品,除了每天冲洗柱子3个小时左右,其余时间都在进样,流动相每天都新配,做了半个月就出现压力升高、在线过滤器堵塞的现象,后来发现还是水相的滤头那里长菌了(因为有缓冲盐)。自己已经很小心了,还是长,可能是环境温度太适宜了。后来清洗过,就好了。自己再多关注下就好了。

请问一下, 你是如何清洗过虑头的?俺是用强酸超声后, 清水超声, MeOH:H2O=1:1再超声, 再用MeOH超声, 每次20分钟吗?这样可以清洗干净, 可是时间不长,又会堵塞.

听说Agilent 的过滤头不能超声的,会使孔径增大。不知道大家是怎么清洗的?
xinyanyan
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水相是很容易长菌,特别是含缓冲盐的,如果有缓冲盐最好每天做之前都过滤下流动相,用缓冲盐的流动相柱压是会越用越高的,用完要及时冲洗,用梯度冲,除非亲水的柱子,要不最好不用纯水冲,对柱子损伤很大,过滤白头我也听说不要超声,说是会损伤塞板什么的,好像一般都用硝酸浸泡,而后再用纯水冲干净,不知是否都是这样
happy爱米粒
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我不知道楼主的小粒径的色谱柱有没有柱前过滤芯,如果有,换个滤芯就可以了,可能是楼主的样品颗粒较大,堵在了柱头上的原因吧,最好高速离心后,过0.2um滤膜再进设备分析
isee
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小粒径柱子寿命本身就短,最好用知名的品牌,另外是要严格遵守柱子储存条件
anthocyanins
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原文由 coolspring(coolspring) 发表:
个人觉得,您的清洗流速使用1ml/min会不会有点高了?一般而言,对于这样小口径的柱子,我们采用的流速最大不超过0.35ml/min,而且一般不用纯水,最后保留在柱子里的通常都是95的有机溶剂和5的水。
另外,您的样品前处理是否合适呢?我也是做农残的,样品上机之前我通常都要12000r离心再过滤头。
个人浅见,仅供参考,欢迎指证!

学习了谢谢
zlssz-1
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冲洗2.1x120mm, 3um柱子时流速一般不要超过0.4ml/min;压力逐渐上升可能你的样品比较脏,流动相含盐也有影响
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