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主题：【讨论】酶标仪和分光光度计的区别，继续。。

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huangza
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2010/9/27 12:57:48 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看来楼上的各位都是高手啊，在酶标仪方面，我刚接触所以还有很多很多的不懂！不知道各位都是怎么从初学者到精通专家的呢？
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kekedeyuluo
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2011/5/23 20:14:03 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很好很专业
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seikagaku
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2011/6/9 0:47:45 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们一直在用酶标仪做吸光度和荧光检测，光度计都退休了。至于结果的可比性，首先酶标仪需要定期校准，确保所有通道的检测性能，其次酶标仪需达到测量所需的灵敏度，基本原则是，标准物的标准曲线要够fit，最低点能测到，而且偏差小，曲线相关系数不比光度计差，那就可以用酶标仪，测量时在一个板里同时做标准和样品以及空白对照。
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dyfjordan23
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2011/6/9 9:24:29 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zwyu(zwyu) 发表:
认同该说法。每次拿移液枪往里加样品，是很难保证加的完全一样的。而且，空白的确定也是个问题。

原文由 高卧东山(littlewing) 发表:
不过，在那个帖子的最后一层，我看到这么一种说法
“分光光度计测量的是以空白溶液为参比，在约定厚度（一般为1cm）的量池中的相对吸光值。因此不同仪器，不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪测定时其光路长度不确定，也无空白参比，得出的是特定条件下的绝对值，因此即使是同一台仪器，不同测量批次之间也其数据不具备直接的可比性。”


原文由 gybgyb(gybgyb) 发表:
最后一个解释是有道理的：
OD值和吸光系数, 待测组分的浓度, 还有光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度都是1cm， 而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是样体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响, 现在有些酶标仪可以通过软件将光路转化为1cm光路长度下的吸光值, 这样就不会受到批次的影响, 而且还可以与分光光度计测得的值进行比较。供参考


另外，有见过一种酶标仪是带比色皿插槽的，光分为8+1束，8个通过待测物，1条光束通过比色皿，作为参比。再加上楼上老师所说的Pathcheck技术，转变为1cm光路长度下的吸光值，这样实现了对一些误差的减小。可以作为比较。
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家有宝贝儿
menghandna
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2011/6/16 14:25:11 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果有参比品，有标准做平行比较，那么结果就是有保证的。
至于前面提到的移液枪的问题，可以考虑为一个实验能接受的系统误差，在一定的可接受范围内，两者应具有一定的对应关系。
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ysh123282
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2011/8/15 17:21:12 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
酶标仪和一般的分光光度计最大地不同就在光路，就是垂直光路和水平光路的区别。水平光路的测量光径是比色池或比色杯决定，而垂直光路是由比色杯中的液体高度决定的。所以酶标板微孔中的液体量就是关键因素了。至于背景吸收或空白对照酶标仪双波长或空白孔更方便。再说一点，目前的酶标仪光学性能也是很出色的，国产酶标2.0ABS以下也是很有保证，大多数进口的能保证3.0ABS，极少数高达4.0ABS。
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蛋白质工作者
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2014/8/17 23:06:23 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我如果用酶标仪车测量相对变化值 就相当于测简单动力学的话 代替分光计影响应该不大吧？
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gongyingpu
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2015/7/24 22:37:21 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我试了两种仪器，测出的OD值差别还是挺大的，比如说生理盐水，分光光度计测的OD为0，但是酶标仪确实0.1多，差别还是挺大的，不知道为什么？
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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2015/12/3 16:45:42 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们在测定很多样品时，就用酶标仪，少量的时候用分光光度计。
就是要做两个方法的验证，比较麻烦。
但用的时候还是方便。
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aikon
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2016/4/14 22:21:55 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是一个没有意义的问题
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