主题:【转帖】色谱柱的清洗

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liuliuhui
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用二氯甲烷或正己烷以后,由于溶剂相容性柱子必须用异丙醇冲洗后才能用原来的水相溶剂。每种溶剂至少冲洗10个柱体积。如250mm×4.6mmHPLC分析柱,分析者可以用1~2ml/min的流速来冲洗,要回复原来的溶剂体系,不需要每一步都冲洗,可以跳过中间步骤。中间步骤推荐使用异丙醇,然后用没有缓冲的流动相,最后回复起始流动相配置。四氢呋喃是另外一种比较受欢迎的去除污染的溶剂。如果使用者怀疑柱子被严重污染,可以二甲基亚砜(DMSO)或者二甲基甲酰铵和水按50:50的比例混合用低于0.5ml/min的流速流过色谱柱。成功再生反相柱子是一个非常耗时间的过程,溶剂冲洗可以利用梯度系统过夜操作。


原来这么多溶剂都可以用来处理色谱柱啊
以前都不知道啊!
ttiam2002
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阿三
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原文由 chqiu111111(chqiu111111) 发表:
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,我们一般都很少用得着异丙醇和二氯甲烷,正己烷冲洗,这种溶剂冲洗一般是做了什么后才用这种冲洗呢?
一般是不用的吧 只有柱效明显降低时才这么处理吧
阿三
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我认为是在用缓冲盐后吧!
用过缓冲盐应该用含水的流动相啊
阿三
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对于典型的硅胶键合柱来说如果没有缓冲溶液的话推荐使用以下溶剂系列:
  100%甲醇
  100%乙晴
  75%乙晴-25%异丙醇
  100%异丙醇
  100%二氯甲烷
  100%正己烷

有人这么用过吗?
过来谈谈经验啊~
对啊 经验很重要
阿三
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原文由 liuliuhui(liuliuhui) 发表:
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用二氯甲烷或正己烷以后,由于溶剂相容性柱子必须用异丙醇冲洗后才能用原来的水相溶剂。每种溶剂至少冲洗10个柱体积。如250mm×4.6mmHPLC分析柱,分析者可以用1~2ml/min的流速来冲洗,要回复原来的溶剂体系,不需要每一步都冲洗,可以跳过中间步骤。中间步骤推荐使用异丙醇,然后用没有缓冲的流动相,最后回复起始流动相配置。四氢呋喃是另外一种比较受欢迎的去除污染的溶剂。如果使用者怀疑柱子被严重污染,可以二甲基亚砜(DMSO)或者二甲基甲酰铵和水按50:50的比例混合用低于0.5ml/min的流速流过色谱柱。成功再生反相柱子是一个非常耗时间的过程,溶剂冲洗可以利用梯度系统过夜操作。


原来这么多溶剂都可以用来处理色谱柱啊
以前都不知道啊!
但实际应用的不多吧
快乐
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原文由 阿三(junqiwudi) 发表:
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,我们一般都很少用得着异丙醇和二氯甲烷,正己烷冲洗,这种溶剂冲洗一般是做了什么后才用这种冲洗呢?
一般是不用的吧 只有柱效明显降低时才这么处理吧


大多数是人是到了柱子快不行的时候,才会采用这种方式。
快乐
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我认为是在用缓冲盐后吧!
用过缓冲盐应该用含水的流动相啊


如果不用含水的流动相,你的柱子就一个字:惨。
头像更新中,请稍候…
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原文由 阿三(junqiwudi) 发表:
但实际应用的不多吧

嗯,是的,实际操作中,很多我都不敢用,呵呵~
头像更新中,请稍候…
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,我们一般都很少用得着异丙醇和二氯甲烷,正己烷冲洗,这种溶剂冲洗一般是做了什么后才用这种冲洗呢?
一般是不用的吧 只有柱效明显降低时才这么处理吧


大多数是人是到了柱子快不行的时候,才会采用这种方式。

这种方式,我感觉效果不大,我也用过,没啥用~
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