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主题：【讨论】柱效测试方法

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发表于：2010/05/21 15:23:57 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱效测试液的配制  

    用微型移液枪移取50µL乙基苯和10µL苯甲酸甲酯于10mL容量瓶中，用乙腈定容，过0.45µm滤膜，即得反相色谱柱柱效测试液。
       
      用微型移液枪移取50µL乙基苯和10µL苯甲酸甲酯于10mL容量瓶中，用正己烷定容，过0.45µm滤膜，即得正相色谱柱柱效测试液。

色谱条件

(1) 反相色谱柱柱效测试色谱条件
  流动相：60%乙腈-40%水；   流速：1.0 mL﹒min-1；   进样体积：10μL。   柱温：室温；   检测波长：UV254nm；

(2) 正相色谱柱柱效测试色谱条件
  流动相：90%正己烷-10%乙酸乙酯；   流速：1.0 mL﹒min-1；   进样体积：10μL。   柱温：室温；   检测波长：UV254nm；
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2010/5/21 15:24:47 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
按上述方法测试柱效，可以吗？
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lxx5052
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2010/5/21 17:19:07 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主是用这个测试过吗？
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2010/5/21 22:11:08 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lxx5052(lxx5052) 发表:
楼主是用这个测试过吗？


没有，看到的资料
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yongw
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2010/5/22 10:45:34 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有过，但是用过甲苯
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yongw
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2010/5/22 10:46:57 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
按上述方法测试柱效，可以吗？

测柱效的目的只是想比较使用过程对柱子柱效的影响，只要要对比的前后用一样的样品即可
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chqiu111111
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2010/5/23 21:59:34 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不是用奈来测定的吗？
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2010/5/23 22:12:27 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 chqiu111111(chqiu111111) 发表:
不是用奈来测定的吗？


对，很多厂家都是用奈来测定，包括仪器检定时，但考虑到成本，这种方式是否能用？
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2010/5/23 22:17:16 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以下是一种最常用色谱柱柱效的方法。

一、基本原理


    高效液相色谱法是以液体作为流动相的一种色谱分析法，它亦是根据不同组分在流动相和固定相之间的分配系数的差异来对混合物进行分离的。气相色谱中评价色谱柱柱效的方法及计算理论塔板数的公式同样适合于高效液相色谱，即：

式中：tR为组分的保留时间

Y1/2为色谱峰的半峰宽度

Y为色谱峰的峰底宽度
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2010/5/23 22:19:12 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
二、仪器和试剂


1．仪器A：A型高效液相色谱仪（紫外检测器）

2．仪器B：B型高效液相色谱仪（紫外检测器）

3．50μl微量进样器

4．试剂：苯、萘、联苯、甲醇均为分析纯；纯水为重蒸的去离子水。

      配制成含苯、萘、联苯各30μl/ml 的甲醇溶液。
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2010/5/23 22:19:55 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
三、实验条件


1．色谱柱1  长15cm，内径 4.6mm，装填10mm的C-18烷基键合固定相

2．色谱柱2..  长15cm，内径 4.6mm，装填5mm的C-18烷基键合固定相

3．流动相  甲醇:水（85:15），流量0.8ml/min

4．紫外光度检测器  波长254nm，灵敏度0.08

5．进样量  5μl
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