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主题：如何才能使血浆中多西环素的色谱峰后移？

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ahong
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发表于：2005/10/29 00:14:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
名位专家：
    你们好！
    我现在正在模索血浆中盐酸多西环素（强力霉素）的含量测定，采用HPLC法，色谱条件如下：紫外检测，色谱柱：安捷伦C8。流动相：0.01M oxalic acid（草酸）–methanol（甲醇）–acetonitrile（乙腈）(60:25:15, v/v/v)。流速为：1ml/min。检测波长为：365。
    上述条件出峰太早，保留时间大约在2.5min。出峰太早往往跟血浆中蛋白质等杂质峰混在一起。上述情况下如何将出峰保留时间延长呢？（血浆中蛋白质等杂质的出峰保留时间一般在6min以前）。
      感谢指导，静候佳音。
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ahong
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2005/10/29 0:17:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
名位专家：
你们好！
我现在正在模索血浆中盐酸多西环素（强力霉素）的含量测定，采用HPLC法，色谱条件如下：紫外检测，色谱柱：安捷伦C8。流动相：0.01M oxalic acid（草酸）–methanol（甲醇）–acetonitrile（乙腈）(60:25:15, v/v/v)。流速为：1ml/min。检测波长为：365。
上述条件出峰太早，保留时间大约在2.5min。出峰太早往往跟血浆中蛋白质等杂质峰混在一起。上述情况下如何将出峰保留时间延长呢？（血浆中蛋白质等杂质的出峰保留时间一般在6min以前）。
感谢指导，静候佳音。
    或者有更好的测定方法，请赐教！
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amihu
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2005/10/29 20:22:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ahong 发表:
名位专家：
你们好！
我现在正在模索血浆中盐酸多西环素（强力霉素）的含量测定，采用HPLC法，色谱条件如下：紫外检测，色谱柱：安捷伦C8。流动相：0.01M oxalic acid（草酸）–methanol（甲醇）–acetonitrile（乙腈）(60:25:15, v/v/v)。流速为：1ml/min。检测波长为：365。
上述条件出峰太早，保留时间大约在2.5min。出峰太早往往跟血浆中蛋白质等杂质峰混在一起。上述情况下如何将出峰保留时间延长呢？（血浆中蛋白质等杂质的出峰保留时间一般在6min以前）。
感谢指导，静候佳音。
    或者有更好的测定方法，请赐教！


推迟出峰时间一般采取衍生一个或几个基团上去，如进行烷基化、酰化、硅烷化等，查查这方面资料。
或者更换流动相、或者前处理上再想点办法将干扰的蛋白质提前除去。
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ahong
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2005/10/30 8:24:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢专家的指导！
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holyy519
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2005/11/4 20:29:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你可以改流动相,如加三乙胺或庚烷磺酸钠,试试看
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ahong
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2005/11/7 12:09:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢专业军士！
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