原文由 plexu(plexu) 发表:
硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。
原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:
看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章,里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题,这个在怎么理解,能详细解释一下吗?有哪些注意事项呢?
原文如下:
中药成份的化合物通常分子量不会太大,120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径,因为分析大分子的机会并不是很多,这个时候60A、80A、100A、120A对分离都不会有太大的影响,倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些,因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A、100A、120A这种。现在做多肽的越来越多,考虑到多肽通常分子量比较大的原因,他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml
原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:原文由 plexu(plexu) 发表:
硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。
实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。
原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:原文由 plexu(plexu) 发表:
硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。
实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。
在选择色谱柱之前,如果已知待测化合物的极性较强,那么在载碳量较高的C18色谱柱上保留都会很短,导致分不开。这时就要考虑用载碳量小的或者不封尾的C18柱。
月旭公司有几款针对极性较强化合物分离用的色谱柱,对极性化合物的保留由弱到强分别是:
AQ-C18, XB-CN, LP-C18
他们的载碳量分别是12%,7%,10%(不封尾)