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主题：【讨论】总黄酮的紫外含量测定有两种方法，方法之间有什么区别呢？

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〓猪哥哥〓

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发表于：2010/07/15 12:57:44 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如题：
测定中药中总黄酮的含量，一个是通过NaNO2+AL（NO3）3法显色后测定
一个是通过ALCL3+缓冲盐体系，
采用UV方法测定其总含量，这两种方法有什么区别，有人做过吗？

该帖子作者被版主皎然加 2积分， 2经验，加分理由：楼主应该举例，叙述检测过程！

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2010/7/16 9:49:01 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

找到了一些相关材料：

亚硝酸钠法源于芦丁含量测定法，并逐步用于黄酮类化合物的测定。后来发现这并不是黄酮类化合物的专属反应，因为凡具有邻苯二羟基的物质，均能用此法进行显色测量。茶叶中含有羟基苯甲酸类、肉桂酸类及原花色素等多酚类物质，这些物质都具有邻苯二羟基结构，显色反应后在504 nm有很强吸收，显然会对黄酮的测定造成干扰，所以该法测定结果偏高。AlCl3法在酸性环境下，只与酮羰基和其邻位羟基发生络合。
AlCl3法测定时，芦丁、桑色素等黄酮类物质反应强烈，而对酚酸类、原花色素的反应很小，该法对黄酮类化合物的专属性较强，适用于茶叶黄酮的测定，因此，选用AlCl3法对茶叶中的黄酮进行定量测定较适宜。

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2010/7/16 9:49:46 Last edit by 03yx2

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2010/7/29 16:58:41 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
如题：
测定中药中总黄酮的含量，一个是通过NaNO2+AL（NO3）3法显色后测定
一个是通过ALCL3+缓冲盐体系，
采用UV方法测定其总含量，这两种方法有什么区别，有人做过吗？

UV法测定黄酮类化合物，一是基于a-色原酮的基本结构形成的紫外特征吸收带，一是基于加入ALCL3、醋酸钠等试剂，引起紫外吸收峰的移动进行定量分析。实际上，由于黄酮类成分中多存在共轭体系或交叉共轭体系，所以多呈现颜色，因此总黄酮的含量测定时，不是“通过NaNO2+AL（NO3）3法显色后测定”，而只是通过这种试剂，改变吸收峰位置，便于进行检测。另外，中药中总黄酮的含量测定法，不是就这两种途径，许多都不用加入这种试剂，用一阶导数光谱法（如淫羊藿总黄酮的测定）、双波长分光光度法（如黄芩苷的测定）都可以完成的。而且，个人觉得，现在都用HPLC了，完全可以用HPLC替代UV。

该帖子作者被版主 土老冒豆豆加 3积分， 2经验，加分理由：应答详细

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