主题:【在线讲座33期】液相色谱柱使用疑难问题解析(答疑结束)

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plexu
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原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
plexu您好!我有以下问题想请教:
请问月旭公司的液相色谱柱接头是大众的还是有自己的规格,我们是waters的分析仪,有月旭的产品可不可以?


月旭公司的色谱柱柱头的规格是大众的,因为我们也不自己生产柱管和柱头,月旭的柱管柱头供货商也是和一些Waters、Agient和Phenomenex一样的,也许是同一家。月旭柱头规格标配是Valco型,但也可以按照客户要求提供Parker型和Waters型。

你用Waters的仪器,而开始也用的是Waters柱子,如果是用不锈钢接头,匝扣的位置就固定了。如果用月旭的柱子,可以把固定匝扣位置的那段剪掉,换一个新的匝扣就可以重新固定匝扣位置。当然如果你已换成PEEK接头,问题就不会很大。
plexu
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原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
原文由 xue2009(xue2009) 发表:
原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
plexu您好!我有以下问题想请教,
请问:我们有一台waters1525色谱仪,最近基线总是呈现波浪形很有规律,波长越小越明显,梯度洗脱时向上飘逸而且后一段时间呈现波浪形,很影响分析,我想问一下,是不是柱子的原因,用的是C18上海安普的?麻烦了1

你看压力稳定不?我估计很有可能是柱子的问题,柱子里面有强保留性物质,建议先把柱子清洗干净,用甲醇或者异丙醇冲洗,不接检测器。

您好!我换了一根新柱子可还是出现上述情况,请问还有哪些原因能够造成上述情况,能给解析一下么?谢谢,各位操作液相色谱的没出现过上述情况么?

应该是流动相组成变引起吸收本底变化造成的,特别是在波长小的时候,乙腈的截止波长低于200nm,但甲醇和水相对比较高,在低波长时,甲醇和水有一定的本底吸收。梯度进行时,随着不同本底的组分含量的变化,基线也会有相应的波动。
老多_小多
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原文由 plexu(plexu) 发表:
原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
plexu您好!我有以下问题想请教:
请问月旭公司的液相色谱柱接头是大众的还是有自己的规格,我们是waters的分析仪,有月旭的产品可不可以?


月旭公司的色谱柱柱头的规格是大众的,因为我们也不自己生产柱管和柱头,月旭的柱管柱头供货商也是和一些Waters、Agient和Phenomenex一样的,也许是同一家。月旭柱头规格标配是Valco型,但也可以按照客户要求提供Parker型和Waters型。

你用Waters的仪器,而开始也用的是Waters柱子,如果是用不锈钢接头,匝扣的位置就固定了。如果用月旭的柱子,可以把固定匝扣位置的那段剪掉,换一个新的匝扣就可以重新固定匝扣位置。当然如果你已换成PEEK接头,问题就不会很大。

虽然接口会影响,但是也没有必要吧,如果不漏,长期这样对柱子不好还是仪器不好?
yangjs88
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plexu您好!我有以下问题想请教,
请问:在做具有缓控释的药物制剂时,色谱柱用过不算长的一段时间后,峰形容易分叉,柱效降低,柱压力升高(柱前装有保护柱),除了按贵公司平时提供的方法清洗外,还有没有其他更好高效的方法来清洗色谱柱或再生,延长色谱柱的使用寿命,谢谢
xue2009
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quote原文由bplexuplexub发表
quote原文由bdongyuzhang520dongyuzhang520b发表
plexu您好我有以下问题想请教

我们在用的氨基柱时有时候峰型突然变宽有拖尾用一段时间就又好了不明白是什么原因造成的如果要再生氨基柱的时候应该怎么做呢?是像您先前回答的问题中提到的用一定比例的氨水冲洗吗?

氨基柱可以直接用纯水冲洗吗?记得当时买的氨基柱那个使用说明书上说不能用纯水冲?是这样的吗?如果可以冲的话一般冲多久?

谢谢quote

氨基柱的硅胶孔内的氨基浓度非常高(大约有1molL)在有水存在的时候在孔内形成一个pH10左右甚至超过10的很强的碱性小环境并会导致硅胶基体慢慢溶解不过硅胶基体的溶解会生成酸性的硅醇基又会降低孔内的pH值延缓硅胶基体的溶解进程一段时间后两个相反的过程会达成一个动态平衡从而稳定下来对你问题提到的这个现象我想到的是这个原因

氨基柱要看氨基柱的应用模式是正相还是HILIC?这两种模式的情况是大不相同的正相使用一般很怕有水但HILIC模式应用一般流动相是乙腈水是不怕水的不过键合氨丙基基团非常容易水解所以一般氨基柱不适宜保存有水的溶剂中作为正相应用时流动相中要求一点都不能含水但清洗柱子上的污染物质是可以含水的因为水有强极性在正相色谱上洗脱能力极强当然不必用100纯水氨基柱具体冲洗方法正相条件按照正相硅胶柱的清洗方法HILIC模式按C18柱的清洗方法quote
"并会导致硅胶基体慢慢溶解不过硅胶基体的溶解会生成酸性的硅醇基"能否写出方程式?谢谢
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2010/8/2 19:35:51 Last edit by xue2009
xue2009
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碱性小环境并会导致硅胶基体慢慢溶解不过硅胶基体的溶解会生成酸性的硅醇基谁能把方程式写出来谢啦
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2010/8/2 20:03:17 Last edit by xue2009
chen0365
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plexu您好!我有以下问题想请教:
请问:我们的液相,为了节约成本我们自己填保护柱,用废的同型号柱子填。但填完以后做标样定量分析有所改变。请问其原因。谢谢。
纸鸢
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plexu您好!我有以下问题想请教:
1、请问怎么测柱效?柱子填料是SinoChrom ODS-BP 5um ,规格4.6mm*200mm
2、我用苯试了一下,峰性大大好,但是不知道理论塔板数,不知道怎么评价,感觉不大好,对称性不好,有点前延,柱子才用了四个月,是什么原因呢?是不是塌陷了呢?有什么补救的办法吗?
3、流动相里之前有酸的,做完后单纯用乙腈冲洗,能把酸冲洗干净吗?之前他们是这样冲的,现在怀疑柱子塌陷了,会不会是长时间在酸性环境中造成的呢?
纸鸢
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原文由 plexu(plexu) 发表:
原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:

分叉峰有很多原因,但大部分是柱子筛板上有颗粒物堵塞的原因。你可以先简单将柱子反冲一下,如果分叉问题解决了,就什么都不用往深的想了。


可是走其他的样好好的呀
还没有反冲过柱子
反冲的话要注意什么呢


可能你走其它样品的时候,柱子没被污染。你试一下,已经产生裂峰后,再进其它样品,看是不是峰还是分裂的?当然颗粒物堵塞筛板,只是一个最可能的裂峰产生原因,但不是唯一的,你排除是这个原因后,再往下排查。

反冲的时候,不接监测器,可以用流动相低流速(0.2ml/min)反冲过夜,或者以正常流速冲1-2小时吧。
再进其它样品,峰好好的,不知道为啥?今天又有一个分叉的,晕死
估计柱子有点问题吧,才用了四个月
反冲一般用什么溶剂呢?乙腈行么?需要加水么?我的流动相是水和乙腈,里面加了酸
乐果
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plexu您好!我有以下问题想请教
  我前一段时间做三聚氰胺用C18色谱响应值很小,几乎无法检测,可是检测标准就是用的C18,后来我用RP18结果响应值很好,不知道什么原因,请问这两个柱子不都是反相色谱柱么?他俩之间有什么不同?谢谢了!
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