我用HPLC来分离多肽,用的柱子是C18
第一张图的流动相是:
A:H20(含0.1%TFA) B:乙腈(不含TFA)
第二和三张图的流动相是:
A:H20(含0.1%TFA) B:乙腈(含0.1%TFA)
洗脱条件均为:
A(%) B(%)
0min 95 5
10min 95 5
60min 0 100
70min 0 100
流速为1ml/min;
其中:第一张图与第二、三张图是分别在不同的地方走了,用的柱子也不同。
第三张图走的是制备型的C18,但是柱子材料和第二张图的完全一样。
那请问大家,为什么当我的目标峰出现后,基线总是会飘移呢?而且还是B中未加TFA的向下飘,加了TFA的向上漂,什么原因呢?那要怎么做才能抑制基线漂移呢?
另外,为什么走制备型的C18,我的目标峰会变成波浪状的山包呢?
谢谢!!!
图(1)乙腈中未加TFA
图(2)乙腈中加了TFA
图(3)制备型C18,流动相条件和柱子填料与(2)图相同,乙腈中加了TFA