这是我收集的一些关于再生的,你可以参考下:
色谱柱在使用一段时间后柱效会下降,这时可以考虑对色谱柱进行再生。进行色谱柱再生时,应使用一个廉价的泵,我们建议最好不使用您的高效
液相色谱仪上的泵。
再生处理包括活化(右→左) 和净化(左→右) 两种。
请根据下表选择您的再生方法:
极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生:
正庚烷←→氯仿←→乙酸乙酯←→丙酮←→乙醇←→水**
非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:
水←→乙腈←→氯仿(或异丙醇)←→乙腈←→水
再生之前先确认一下使色谱柱失效的主要原因是什么,有针对性的再生。
如果是强保留物质则用甲醇、四氢呋喃、氯仿、异丙醇、正己烷、异丙醇、氯仿、四氢呋喃、甲醇的顺序各冲洗45min。
如果是蛋白质累积造成的,则用乙腈:水:三氟乙酸=50:50:0.1%冲洗色谱柱60min;
对于典型的硅胶基质键合反相柱,在未使用缓冲溶液的条件下,推荐使用以下清洗溶剂系列:
100%甲醇---100%乙晴---75%乙晴/25%异丙醇---100%异丙醇---100%二氯甲烷---100%正己烷
用每种溶剂冲洗至少10个柱体积,对于250mm×4.6mm的分析柱,合适的冲洗流速是1~2ml/min。最后用10柱体积的异丙醇过渡,然后回到原来的流动相体系(但不含缓冲盐),最后回复到起始流动相配置。四氢呋喃也是另外一种常用的清洗溶剂。如果怀疑柱子被严重污染,还可用二甲亚砜(DMSO)或 二甲基甲酰铵和水按50:50的比例混合,以低于0.5ml/min的流速冲洗色谱柱。
两种再生法:1.甲醇:水=90:10-甲醇-二氯甲烷-甲醇-甲醇:水=90:10依次冲洗.
2.水—乙腈—氯仿(或异丙醇)—乙腈—水依次冲洗.这两个方法选一种也可以。