时间(min) | A(%) | B(%) |
0 | 71.5 | 28.5 |
30 | 69.5 | 30.5 |
56 | 46.0 | 54.0 |
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原文由 kqz793360(kqz793360) 发表:
我现在做一分子量3464等电点10.9的多肽。纯度测定方法是参考国内一家企业的方法。 色谱条件如下
流速:1.0ml/分钟,上样量:40μl(0.5mg/ml浓度),柱温:50℃,检测波长:210nm,样品池温度:4℃,流动相A:<SPAN style="FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 'Times New=" New? Roman?,?serif?;"FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 宋体;" New?"New" Roman?;>硫酸铵水溶液(<SPAN style="FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 'Times New=" New? Roman?,?serif?;"FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 'Times New=" New? Roman?,?serif?;"urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags" />50mM<SPAN style="FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 宋体;" New?"New" Roman?;>硫酸铵<SPAN style="FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 'Times New=" New? Roman?,?serif?;"FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 宋体;" New?"New" Roman?;>乙腈溶液
洗脱梯度见表样品主峰拖尾,对称因子1.6。目前我用的色谱柱式4.6*150mm,上样量20ug并不大,色谱柱也是新的,所以这些原因都可以排除。我怀疑是我们缓冲体系不对,我还是搞不懂缓冲盐在这里具体起什么作用?我今天在<SPAN style="FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 'Times New=" New? Roman?,?serif?;"FONT-SIZE: 10.5pt; LINE-HEIGHT: 150%; FONT-FAMILY: 宋体;" New?"New" Roman?;>硫酸铵水溶液中加入10mM三乙胺没有得到改善,后增加至20mM拖尾一点都没改善。到底是什么问题呀?请各位帮忙啊。
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28.5
原文由 kqz793360(kqz793360) 发表:
我现在做一分子量3464等电点10.9的多肽。纯度测定方法是参考国内一家企业的方法。 色谱条件如下
流速:1.0ml/分钟,上样量:40μl(0.5mg/ml浓度),柱温:50℃,检测波长:210nm,样品池温度:4℃,流动相A:硫酸铵水溶液,
流动相B:乙腈溶液
洗脱梯度见表样品主峰拖尾,对称因子1.6。目前我用的色谱柱式4.6*150mm,上样量20ug并不大,色谱柱也是新的,所以这些原因都可以排除。我怀疑是我们缓冲体系不对,我还是搞不懂缓冲盐在这里具体起什么作用?我今天在硫酸铵水溶液中加入10mM三乙胺没有得到改善,后增加至20mM拖尾一点都没改善。到底是什么问题呀?请各位帮忙啊。
时间(min)
A(%)
B(%)
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71.5
28.5
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