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主题：【求助】发酵液分离成不同分子量问题？

浏览0 回复4 电梯直达
vcnet155
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发表于：2010/11/23 23:34:10 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分离发酵液中不同分子量物质


我是做豌豆酸浆的发酵的，老板让我先把发酵液分离成不同分子量的两种溶液，一种是大分子量，一种小分子量。我应该用什么来做呢？是超滤还是层析？本人刚做实验属新手。。。。忘大家不吝赐教！！！

我的分离后的各组分都需要用。用透析袋透析可以吗？

但是我买的透析袋是常常的一条带子，只有2,3十厘米宽。和“袋子”差距很大啊。谁知道怎么用吗？
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dahua1981
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2010/11/24 9:54:22 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以考虑过柱子试试
萃取
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tianru的爸爸
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2010/11/25 10:14:48 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以用透析袋。

超滤比层析好。因为超滤处理量大，适合于制备，而层析处理量小，适合于分析。

超滤与透析要考虑两个的截留分子量是多少。以这个分子量大小来分大、小分子量。

超滤比透析好，因为超滤可以不增加其它溶液，而透析需要增加其它溶液来接受小分子量溶剂。
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2010/11/25 10:34:51 Last edit by lxdongzi2003
tianru的爸爸
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2010/11/25 10:18:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般的透析袋在使用前的处理：
1. 把透析袋剪成适当长度（根据你的样品量来决定）的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。
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tianru的爸爸
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2010/11/25 10:24:08 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
透析袋使用时：
一端扎紧（用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用大小合适的专用的透析袋夹夹紧），由另一端灌满水，用手指（记得戴手套）稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。
为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。

——大分子量的在透析袋里面，小分子量的在透析袋外面，再把外面的溶液浓缩就是你的小分子量溶液了。
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