主题:【求助】固相萃取oasis HLB ???

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zsc2099
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最近做药残,用到SPE
我选用的小柱是 waters oasis HLB 3ml ,按照说明书上,
活化液甲醇 1ml +  水 1ml ,,上样后用1ml 的水或5%甲醇淋洗,洗脱液用1ml的甲醇。。。

但是在看文献时,发现文献上的活化液,淋洗液,洗脱液的体积都是5ml,还有7ml的、、、

请问他们的体积如何定下来的???
那么说明书上的体积又是干嘛的呢???
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zsc2099
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雾非雾
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原文由 zsc2099(zsc2099) 发表:
最近做药残,用到SPE
我选用的小柱是 waters oasis HLB 3ml ,按照说明书上,
活化液甲醇 1ml +  水 1ml ,,上样后用1ml 的水或5%甲醇淋洗,洗脱液用1ml的甲醇。。。

但是在看文献时,发现文献上的活化液,淋洗液,洗脱液的体积都是5ml,还有7ml的、、、

请问他们的体积如何定下来的???
那么说明书上的体积又是干嘛的呢???


说明书应该是建议用量,不过1ml的淋洗体积感觉有点太小了。洗脱体积可以根据洗脱曲线来确定最适合的值。
abc_1982
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其实具体的量应该是方法优化出来的,应该存在穿透体积,具体的量适合填料量和目标化合物与吸附剂的作用力大小决定的。一般能够达到孔容的4倍就可以了。
zsc2099
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原文由 abc_1982(abc_1982) 发表:
其实具体的量应该是方法优化出来的,应该存在穿透体积,具体的量适合填料量和目标化合物与吸附剂的作用力大小决定的。一般能够达到孔容的4倍就可以了。


恩,这个4倍关系怎么来的呢?
我觉得一般的淋洗量和洗脱量都是过量的。。。
crystal_cc_ice
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这个说明书,偶觉得是他们自己做的应用试验的结果,那国标也是不同的人做的方法,其实就是两种都能实现,俺是这样感觉滴,看你能重现哪种了
houqin
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首先确定你收集淋洗液还是洗脱液,或者两者一起收集。然后按已确定的其他正确操作条件(正确活化 ,洗脱速度,用量)    进行预实验    比较文献和说明书的实验结果,根据你萃取柱的大概萃取率来反推,如果用量大的萃取效果很好且能完全洗脱,再进行减量,直到Min洗脱液,得到最佳洗脱体积。若只是要求能完全洗脱,就不必达到Min。量大肯定能洗脱完,最后根据萃取后稀释倍数就可以得到萃取率。
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