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毛细管电泳（CE）
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主题：【讨论】毛细管电泳基线上漂问题

浏览0 回复7 电梯直达
jcok123
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发表于：2011/03/16 11:13:36 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：20积分 状态： 已解决
用的是贝克曼的CE，两次实验的结果在图中。

上图：去年的结果，前几针倾斜，后来慢慢变成水平的直线正常了（应该是氘灯预热到稳定的过程）

下图：今年的结果，进了好几针，基线总是呈拱形，一点变缓和的迹象都没有。去年的结果重现不出来了。

今年实验时:毛细管预处理方法（氢氧化钠30min—甲醇30min--水6omin——缓冲液60min），缓冲液都是新配的，电流也很稳定，进口的氘灯也查了才用了1600多个h，还是解决不了基线上漂的问题。
请大家帮帮忙，集思广益。多谢了！
推荐答案：叮叮当当回复于2011/03/28


谢谢！
试过不进样，进的是单独的缓冲液（溶解样品的）以及超纯水，基线还是呈拱形，只是没峰而已。

“把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干？  接上管子通氮气？

走空白，基线拱形，说明和样品没有关系。问题可能是在氘灯、光路和毛细管以及缓冲液上边。
氘灯测试下能量，逼近快2000h了，稳定时间久一点看看是否飘逸严重。
光路可能性最小，最好有新毛细管活化一下和配点新的缓冲液空白运行排除一下看看。
补充答案：

heguang回复于2011/03/16

先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。
把毛细管清洗了以后空气吹干，加电压空跑，看基线情况。

cpudaxiao回复于2011/03/16

氢氧化钠5min—甲醇5min--水8omin——缓冲液10min

用这个程序走两次就好了。

ericwong回复于2011/03/18

更换一根新的毛细管试试

该帖子作者被版主 userwzy加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
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2011/3/16 18:39:19 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氢氧化钠5min—甲醇5min--水8omin——缓冲液10min

用这个程序走两次就好了。
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heguang
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2011/3/16 19:23:10 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。
把毛细管清洗了以后空气吹干，加电压空跑，看基线情况。
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jcok123
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2011/3/16 20:37:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 heguang(heguang) 发表:
先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。
把毛细管清洗了以后空气吹干，加电压空跑，看基线情况。


谢谢！
试过不进样，进的是单独的缓冲液（溶解样品的）以及超纯水，基线还是呈拱形，只是没峰而已。

“把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干？  接上管子通氮气？
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jcok123
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2011/3/16 20:52:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
氢氧化钠5min—甲醇5min--水8omin——缓冲液10min

用这个程序走两次就好了。


嗯  谢谢 我试试
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heguang
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2011/3/17 18:18:29 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 jcok123(jcok123) 发表:
原文由 heguang(heguang) 发表:
先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。
把毛细管清洗了以后空气吹干，加电压空跑，看基线情况。


谢谢！
试过不进样，进的是单独的缓冲液（溶解样品的）以及超纯水，基线还是呈拱形，只是没峰而已。

“把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干？  接上管子通氮气？


放一个空瓶在仪器里，然后用空瓶冲洗毛细管，几分钟毛细管就干了。
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ericwong
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2011/3/18 9:46:39 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
更换一根新的毛细管试试
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叮叮当当
wangskyi
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2011/3/28 16:44:41 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 jcok123(jcok123) 发表:
原文由 heguang(heguang) 发表:
先空毛细管或者不进样测试一下你的氘灯检测系统是否正常。
把毛细管清洗了以后空气吹干，加电压空跑，看基线情况。


谢谢！
试过不进样，进的是单独的缓冲液（溶解样品的）以及超纯水，基线还是呈拱形，只是没峰而已。

“把毛细管清洗了以后空气吹干”--怎么空气吹干？  接上管子通氮气？


走空白，基线拱形，说明和样品没有关系。问题可能是在氘灯、光路和毛细管以及缓冲液上边。
氘灯测试下能量，逼近快2000h了，稳定时间久一点看看是否飘逸严重。
光路可能性最小，最好有新毛细管活化一下和配点新的缓冲液空白运行排除一下看看。
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