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主题：【求助】样品检测发现问题，这个要怎么解决？

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xiaowei86006
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发表于：2011/05/11 17:50:45 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有没有人做过磷脂酰胆碱的测定啊？
本人要检测大豆磷脂里面的磷脂酰胆碱
按GB/T 21493-2008方法检测
高效液相法，正相
Si 60柱子，250mm*4.6mm，5μm
流动相：正己烷：异丙醇：1%冰醋酸=8:8:1
流速1ml/min，柱温30度，波长205
但是走了两个小时
对照都没有出峰
因为之前很少做正相
找不到问题的原因
请各位前辈指点一下！
万分感谢！
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xiaowei86006
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2011/5/12 11:12:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的安捷伦Si 60柱子，250mm*4.6mm，5μm
另外还用过Waters硅胶柱，3.9*150mm，都不行

进的就是2mg/ml的对照，进样量10μl

国标是205nm，药典好像是206nm，差别不大

请大家帮忙！！
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2011/7/11 15:15:05 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 (xiaowei86006) 发表:
用的安捷伦Si 60柱子，250mm*4.6mm，5μm
另外还用过Waters硅胶柱，3.9*150mm，都不行

进的就是2mg/ml的对照，进样量10μl

国标是205nm，药典好像是206nm，差别不大

请大家帮忙！！


我用反相柱侧过磷脂，在低波长下检测灵敏度很低的，流动相还干扰，我进的样品浓度也和你的差不多，我觉得你可以尝试往流动相里加点缓冲盐。磷脂用紫外测真的很难测到，不行就试试蒸发光散射检测器吧，我现在也想用蒸发光探索一下呢，到时候我们可以在讨论
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