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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】分离高浓度小分子有机酸

浏览0 回复14 电梯直达
plumbenben
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发表于：2011/05/17 17:07:38 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新手求助，做CE将近一个月了，坛子里的帖子挨个看了有一半了，今天把自己的情况发出来，帮我指点一下。

我要用CE分离小分子有机酸，用的是beckman的P/ACE MDQ。

硼砂缓冲液30mM, pH10, EOF Marker用的是 DMSO。

电压：15KV

有机酸：醋酸，三氟乙酸， 扁桃酸，柠檬酸

浓度在2.5mM 和 25 mM时能得到比较不错的分离，但是在浓度125mM时电流就不再稳定，把电压降到7kv，电流稳定了，但出来的峰不是特别好，请问还有什么其他办法，能在高浓度时改善分离？
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2011/5/17 22:30:08 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
125mM的时候电流是多少？
电压低，出峰时间长，离子的扩散速度太快了，峰型就不好。
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plumbenben
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2011/5/17 22:32:55 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
7KV时电压是24µA
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plumbenben
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2011/5/17 22:34:16 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
另外请问样品浓度高为什么电流不再稳定了呢？
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2011/5/17 22:35:33 Last edit by plumbenben
userwzy
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2011/5/18 8:45:13 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为何要分离高浓度？另外，电泳的浓度线性范围 比较窄。
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ericwong
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2011/5/18 13:09:01 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
任何仪器都不会在任何浓度下都适用，总有其使用的线性范围。
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plumbenben
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2011/5/18 15:22:05 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
因为准备ce和NMR联机，NMR需要样品浓度大，所以正在摸索用ce分离高浓度。
100mM是不是对于就算很高了？
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2011/5/18 15:22:42 Last edit by plumbenben
ericwong
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2011/5/19 11:28:52 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主在用NMR分析时，需要多大的浓度？
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plumbenben
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2011/5/19 19:21:25 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大约500mM的浓度
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ericwong
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2011/5/20 11:23:14 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉对于毛细管电泳来说，样品500 mM的浓度似乎有些大了。
毛细管电泳还是适用于微量检测。
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plumbenben
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2011/5/20 18:01:09 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:
感觉对于毛细管电泳来说，样品500 mM的浓度似乎有些大了。
毛细管电泳还是适用于微量检测。


好的，谢谢了
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