主题：【极限体验&说出你的故事】使用Ultimate XB-C18柱分析某样品小记（5月份）

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发表于：2011/05/19 03:19:07 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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1. 发贴背景
虽然极限的柱子很早就拿到了，也分析过不少样品，却一直没想过要发极限体验的贴子。因为本人所从事的主要是提取分离、微生物转化、代谢这三个方向的工作，对于分析行业接触较少，不想跟那些什么分离度、什么理论塔板数、什么峰面积、什么相关系数等等沾边。
跟小S聊了聊，小S说，只要是极限体验的，不管什么样的数据我们都欢迎啊，欢迎就好，那就来个最简单最直观的。我会尽可能地写得像模像样一些，尽可能。。

2. 仪器与试剂
甲醇：天津大茂产的分析甲醇，重蒸了当色谱甲醇用——寒碜不？我也不想这样。。
水：饮用水重蒸了当色谱纯用——其实实验室有纯水机，不知道为什么没人用过。。
HPLC：Waters 高效液相——Waters Model 600 controller液相色谱配Waters 996 DAD检测器。。
其它试剂均为分析纯

3. 色谱条件
色谱柱：Ultimate XB-C18柱(5μm， 4.6x250mm)和某品牌色谱柱(5μm，4.6x250mm)。。
流动相：A泵甲醇、B泵为0.05%乙酸水溶液(A：B=50：50)；
流速：1.0mL/min；
柱温：室温（约20度）；
检测波长：190-400nm全波长扫描；
进样量：约5微升；

4. 样品情况
经过乙醇/水提取、各种溶剂萃取，再经过反复硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、ODS柱色谱等众多纷繁复杂的前处理手段，终于得到这么个样品（实在不容易）。样品组成、含量、结构类型均未知（不是我不愿意告诉大家，也不是要保密，因为我还没分离得到，没有进行结构鉴定，我确确实实不知道是什么东西）。
值得庆幸的是，我可以底气十足地说，这是栀子中的样品（绝对不是栀子苷），一个可能是芳环取代的环烯醚萜苷类、一个可能是单环单萜苷类（真的只知道这么多）。

5. 结果与讨论（其实就是扯淡，怎么好怎么说，一路"忽悠"到底。。）
这是某品牌色谱柱分析得到的色谱图

这是某品牌色谱柱分析得到的色谱图（放大图谱）

这是Ultimate XB-C18柱分析样品得到的色谱图

这是Ultimate XB-C18柱分析样品得到的色谱图（放大图谱）

5.1 看图说话：从图1、图2、图3、图4中很明显就能看出，某品牌色谱柱对该样品的分离度不是很好，未能将它们进行很好地分离。相反，观察Ultimate XB-C18柱的分析结果可以看出，它对此样品的表现出了优秀的分离能力，将保留时间为13.10min和13.75min的两个主峰达到了基线分离。

5.2 看图说话：除了保留时间为13.10min和13.75min的两个主峰外，相比于某品牌色谱柱，Ultimate XB-C18柱对保留时间为10.00~12.50min内的峰也表现出了良好的分离能力。由某品牌的“馒头”峰变为隐约可见的众多小峰。我们有理由相信，在经过微调流动相组成之后，这些小峰也能得到很好的分离。

5.3 通过观察色谱图，结合平时经验，可以推测，保留时间13.75min的主峰含量并不大，真正的主峰只有一个（即保留时间为13.10min的峰）。此处选取340nm波长进行截图展示，是为了直观、简洁。DAD检测器发挥了它应有的价值，如果“激情”一点，那就是：千言万语化成一句话——DAD检测器万岁！！

5.4 虽然没有考察不同流速、样品、流动相比例、PH值、温度等各方面因素影响，只是一个最为简单的色谱实验，但其直观、明了、简洁是不可比拟的，本贴将对以后的实验提供重要的参考价值。

6. 结论
月旭Ultimate XB-C18柱，你还不试用吗？