主题:【已应助】【求助】关于hilic色谱柱分析氨基糖苷类的问题

浏览0 回复32 电梯直达
可能感兴趣
雪妖
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 wh2008(wh2008) 发表:
原文由 新窦(capinter) 发表:
“1. 使用等度洗脱,乙腈:水=90:10,所有项目的保留时间都在2.6min”
感觉这更像是C18柱走出来的结果。

不知楼主当时的HILIC新柱是如何进行活化的?新柱必须进行正常的活化步骤色谱柱才可能以HILIC模式工作的。


感谢回答。

活化时跟c18活化一样,使用乙腈和水冲洗的。
我现在也怀疑是不是柱子被我弄坏了,看资料中说新柱子最好用乙腈:10mM缓冲盐(甲酸铵)(50:50)或0.2%的添加剂(我理解是指甲酸)来平衡,难道差别真的这么大?


新柱子用这个活化的机理是什么呢
胜邪
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
dahua1981
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
wh2008
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 雪妖(czj_1027) 发表:
原文由 wh2008(wh2008) 发表:
原文由 新窦(capinter) 发表:
“1. 使用等度洗脱,乙腈:水=90:10,所有项目的保留时间都在2.6min”
感觉这更像是C18柱走出来的结果。

不知楼主当时的HILIC新柱是如何进行活化的?新柱必须进行正常的活化步骤色谱柱才可能以HILIC模式工作的。


感谢回答。

活化时跟c18活化一样,使用乙腈和水冲洗的。
我现在也怀疑是不是柱子被我弄坏了,看资料中说新柱子最好用乙腈:10mM缓冲盐(甲酸铵)(50:50)或0.2%的添加剂(我理解是指甲酸)来平衡,难道差别真的这么大?


新柱子用这个活化的机理是什么呢

hilic色谱柱需要至少2%的水来保持其活性。
zhc609
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
tdbjphn
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
链霉素这个东东的残留确实比较难做,开始可以做到比较满意的灵敏度和精确度,但是随着时间的延长,不知道什么原因会灵敏度越来越低,我觉得不同的仪器可能关系很大,同样的方法,不同实验室灵敏度不同,而且差异也很大,由于前处理一样,所以本人认为仪器也是一方面的原因。目前,本人也在考虑是否用HILIC柱来做。不过,看到亲们的言论,我有点打退堂鼓了。
kylabs
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
发一个万古霉素的方法给大家一起参考,虽然条件是HPLC的,但是也可以用作LCMS

Method Conditions

ColumnCogent Diamond Hydride™, 4µm, 100A
Catalog No.70000-7.5P
Dimensions4.6 x 75 mm
Solvents
A:DI H2O/ 0.1% formic acid
B:Acetonitrile/ 0.1% formic acid
Gradient
time (min.)%B
070
610
770
Post Time2 min
Injection Vol.5 microL
Flow rate1.0 mL/min.
DetectionUV 210 nm
SampleStock Solution: 1 mg/mL vancomycin HCl in 50/50 solvent A/solvent B diluent. The solution was filtered through a 0.45 µm nylon syringe filter (MicroSolv Tech Corp).
Working Solution: Stock solution was diluted 1:100 with 50/50 solvent A/solvent B mixture.
PeakVancomycin
t00.9 min
bbsea_sky
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
链霉素\双氢链霉素是比较难做的,其它几种还好做一点;我收集了各大仪器公司的方法,其中waters的加了50mM以上的甲酸铵,说实话,不是很可信

有时间的时候再详细讨论!
sdyanyulin
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
这两个项目,都是不好做的,年杆菌素在液质上走的不好,我认为与离子化效果有很大关系,他存在很多的电离方式,会产生很多的离子对,我认为是不是衍生一下,或者采用什么方式固定一下离子结构,再离子化的时候会好一点。庆大霉素,采用七氟丁酸对仪器影响很大,建议不要采用;我们也在努力的攻克这个项目;
amongne
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴