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主题：【求助】制备HPLC，如何根据峰宽和峰高估摸样品组分的含量

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yvonner
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发表于：2011/11/21 23:35:45 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
听别人说，在制备HPLC中，采用200nm波段进行检测或分析，能够根据组分在200nm下峰的宽度和高度推测该组分在整个样品中的含量，从而选择性接峰，避免在其他波段下检测到很高的峰，而实际上含量却很低。
然后我实际操作了一下，结果是在200nm下有很多很好吸收的峰，而其在其他纳米下几乎没有吸收，或者仅仅在220纳米下，有较低的吸收峰。
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2011/11/21 23:37:49 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
200nm的话，流动相本身有无吸收，检测器是否足够稳定。
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xizhi
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2011/11/22 8:37:14 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
通过吸收峰的峰宽、高度甚至面积来判断样品的量不太现实，除非做了非常详尽的对照，因为样品的吸收情况还要受到检测波长、其它峰相对面积、流动相参比、样品溶解的是否充分以及样品本身的基团等因素影响，要想判断出含量这些因素要都考虑进去的
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xiaowang268
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2011/11/22 9:17:02 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个有什么根据吗？不是这样的，做制备还是接平头峰的
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八毛的老公
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2011/11/22 9:52:51 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么要用制备估摸样品组分的含量啊？
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flyaway
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2011/11/23 9:11:16 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 八毛的老公(tamadejkl) 发表:
为什么要用制备估摸样品组分的含量啊？


就是, 本来就不是靠谱的方法,怎么能得到靠谱的结果?
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yvonner
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2011/11/23 17:18:40 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tangtang(tangtang) 发表:
200nm的话，流动相本身有无吸收，检测器是否足够稳定。

请阁下明示！谢谢！
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yvonner
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2011/11/23 17:21:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 八毛的老公(tamadejkl) 发表:
为什么要用制备估摸样品组分的含量啊？

如此才能判断，是否有接峰的必要！以及众多峰中，接哪个或哪几个峰合适！
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