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主题：【求助】进复杂样品对柱子的影响

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wangruiting
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发表于：2011/12/13 16:51:54 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，我做的样品是一种水果，成分比较复杂，样品提取用的甲醇-水回流，文献上大多是这么做的，但是老师担心会对柱子有影响，我每天进完液相后，都用纯甲醇冲洗，的确有东西出来，并且我的流动相体系是缓冲盐，每天都是先冲会甲醇，再用等比例的水-有机相过度，接着用大比例水冲洗，最后用甲醇再冲，不知道这样做有没有问题，也不知道怎样确定是否还有脏东西保留在了柱子里，请大家指教啊！
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2011/12/13 18:16:47 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相里有缓冲盐，不要先冲甲醇，容易析出。
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yinzongyuan123
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2011/12/13 18:37:33 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先用低比例的甲醇冲洗，直接用甲醇，盐就析出来了
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xiaowang268
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2011/12/13 18:41:18 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先用低比例的甲醇水体系冲洗，在逐渐加大甲醇含量直到纯甲醇冲柱30min。
该帖子作者被版主 zhaohua8011加 2积分， 2经验，加分理由：应助
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xiaowang268
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2011/12/13 18:42:31 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一段时间后，最好用乙腈冲柱一定时间
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wangruiting
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2011/12/13 18:52:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yinzongyuan123(yinzongyuan123) 发表:
先用低比例的甲醇冲洗，直接用甲醇，盐就析出来了

不用直接用同比例的水和有机相冲洗么？我用的是50%的甲醇
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wangruiting
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2011/12/13 18:54:15 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yinzongyuan123(yinzongyuan123) 发表:
先用低比例的甲醇冲洗，直接用甲醇，盐就析出来了

好的 之前是想先用甲醇冲看看冲出东西来没，那请问盐析出了，主要是在管路里还是在柱子中呢？
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wangruiting
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2011/12/13 18:55:06 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
一段时间后，最好用乙腈冲柱一定时间

好，下次就冲，谢谢
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wangruiting
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2011/12/13 18:56:50 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我还想知道的是 如何确定柱子中的脏东西都冲出来了呢?
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zhaohua8011
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2011/12/14 12:57:12 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先用低比例的有机相，再慢慢升高！
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sunjun0620
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2011/12/14 13:18:10 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般最好先用水冲洗，然后换用甲醇或者是乙腈冲洗，最后在过渡到流动相。经常做复杂样品最好用个预柱，能保护色谱柱。
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