主题：【咨询】HILIC填料到底怎么用？

hilic 有非极性 离子型 极性 三种作用力构成。

hilic的保留机理类似于正相色谱，固定相极性强（因为要保留强极性的化合物），但他解决了正相溶剂不能溶解样品（亲水性样品）的缺点。所以hilic相当于采用反相的溶剂系统，却具有正相色谱的出峰顺序（也就是说相当于是在正相模式下，但突破了正相模式下溶剂的局限性——很多极性样品不能溶于正相溶剂）。
hilic模式是专门针对强极性和强亲水性的化合物的色谱分析而设计的，这些物质以正相色谱和反相色谱不能进行色谱分析。

不知道我说的对不对，我也是在学习中……大家一起讨论，共同进步……

原文由 sally0326(sally0326) 发表:
曾经在宣传手册上看到有HILIC的填料，据说可以当反相用，也可以当正相用，顿时产生很多疑惑，故希望得到解答：
1、HILIC填料反相用途
      一般情况下反相用法中都是流动相极性减小，样品洗脱性增加。HILIC是不是也是这样的顺序呢？
    举个简单例子：
  甲醇-水体系，是增加甲醇浓度洗脱性增强么？

2、HILIC填料正相用途
      一般情况下正相用法中都是流动相极性增加，样品洗脱性增加。HILIC是不是也是这样的顺序呢？
    举个简单例子：
  乙酸乙酯-正己烷体系，是增加乙酸乙酯浓度洗脱性增强么？

3、新问题
    如果按照以上两条，其洗脱性与正相、反相吻合，那么，中间过渡时候是怎么个洗脱呢？
比如：
甲醇-异丙醇体系、甲醇-二氯甲烷体系，是算正相洗脱原理？还是反相洗脱原理呢？

希望能给几个具体应用给讲讲

有当正相用的案例吗？

就没有一个人能讲清楚吗，越看越晕？

期待高人出现

请各位朋友，看一下附件，里面有HILIC色谱原理的具体的介绍以及一些应用案例。
实际上传统的正相、反相的概念，从固定相和流动相极性的大小来定义，并不能很系统的反应色谱洗脱的机理。色谱洗脱过程中，涉及到固定相、流动相和待分析物质三者之间的动态作用，我们应该从这三者之间的作用力来考察和分类。
1、“没有保留就没有分离”。——首先固定相要对待分析物质有保留，才能进行后续的色谱分离。如果各个待分析物质都在死时间出峰，是不能接受的。色谱技术一开始发展的时候，选用的是硅胶等固定相，这类固定相通过氢键、离子交换等作用对待分析物质进行保留。后来人们发现这类固定相提供的作用力太强，会吸附待分析物质的碱性基团等位点，造成死吸附，于是就开发了C18等固定相（历史传承的关系，被命名为反相），通过疏水作用力保留待分析物（但是疏水作用力相对氢键、离子交换作用力是很弱的，所以C18的载样量相对要小的多）。一般来说，正相色谱使用于极性强的物质，反相色谱适用于极性弱的物质，因为首先要实现保留。
2、“理论上说，只要不同的待分析物质和固定相之间的作用力有差异，就可以通过弱洗脱力的流动相的无限长时间的洗脱将它们分开；但是为了使色谱过程具有可行性，需要调整合适的流动相来尽快完成分离过程”。——这也是为什么正相色谱时选用正己烷为基础流动相，通过增加流动相的极性来在保证分离的同时，也能用较短的时间实现分离。同样地，反相色谱时选用水为基础流动相，通过增加其非极性来增加洗脱。
3、“亲水作用色谱是为那些在反相、正相色谱上不能进行保留和分离的物质而设计的”。——某些物质在反相色谱上保留很弱，而在正相色谱上保留没有问题，但是用传统的正相色谱的流动相（极性小、含水量少）又不能实现洗脱，需要用乙腈水等水性流动相去洗脱才可以。由于这种模式和传统的正反相色谱都不一样，所以人们称之为HILIC。

结论：正相色谱、反相色谱、HILIC色谱这样的分类，只是形象的描述，对于刨根究底的朋友容易造成困扰。但是如果我们从色谱过程的固定相、流动相和待分离物质三者之间的关系去考察，先从固定相和待分析物质的保留入手，再探究流动相洗脱待分析物质，就明白什么叫HILIC色谱了。
明白其中的根本原因，我们也可以形象的说：HILIC色谱就是用高含水的流动相的“正相色谱”。

接上贴：
    说HILIC色谱当正相还是反相用，其实是不准确的，因为它按传统的“反相”用的时候意义不大，因为流动相的洗脱力远大于固定相的保留力，待分析物质很快就出峰了，它们之间的分离度很差。

    如果我们非要对色谱分离过程进行正反相的分类的话，也就是说非要考察固定相和流动相的极性大小，那还不如考察固定相与待分析物质之间的作用力F1和流动相与待分析物质之间的作用力F2的大小。
    F1=F2时，可以认为此时固定相和流动相的“极性”相同。（F1、F2可等同于固定相和流动相的极性）
    （1）固定相是硅胶/氨基键合硅胶/丙基酰胺键合硅胶/氰基键合硅胶等
    当F1<F2时，反相。流动相可能是很高的水相，甚至加了酸。
    当F1>F2时，正相。
    （2）固定相是C8、C18键合硅胶等
    当F1<F2时，正相。流动相可能是比C18极性还小的液体（液态蜡？）。
    当F1>F2时，反相。
上述结论有：即使是用硅胶作为固定相，也有可能出现反相色谱；即使是用C18作为固定相，也有可能出现正相色谱。所以有时候，理论总是那么不切实际，但是理论必须严谨才能经得起推敲。所以大家使劲钻牛角尖吧，呵呵。

楼上的，应该算是个理论与实践结合的高人了，呵呵，比我说的系统多了，不过我的“板凳”也有点道理吧，哈哈，学习学习，有讨论才能有进步

色谱理论中有个通用的原理：相似相溶。这个说法很简单很形象，也很好很强大！有助于理解色谱。
    色谱中涉及到的作用力其实就是电磁作用力。极性不就是电荷分布不均引起的吗？如果太过不均，分子就成了离子了，产生离子交换作用了。至于什么氢键作用、金属的配位作用，也都是电荷分布不均引起的。
    而如果电荷分布比较均匀的时候，如油脂和C18之间是什么情况呢？如果形象点讲，是疏水作用力（它们在水中时，会在一起），但是牛顿不会同意这个说法——没有这种力啊！准确的讲是范德华力（色散力、诱导力、取向力），它也是分子中电荷瞬间分布不均引起的，但是要从统计学角度考察才有意义。这种力比具有经常性的分布不均的电荷的分子之间的作用力要小得多！

    所以按可以提供的作用力的大小次序，将一些常见的固定相排列为：离子交换的固定相>硅胶>氨基>丙基酰胺>氰基>C8>C18。

    没法一一穷尽所有的固定相，写了这么多，有点累，不能钻牛角尖了，大家有兴趣自己去排吧。
   
    另外，说了这么多，还得宣传下我们的HILIC色谱柱，不然老板要批评工作了。按照我上面说的，HILIC就是一种流动相含水多的正相色谱，其实硅胶、氨基、氰基都可以做HILIC色谱。不过我们的HILIC柱键合的是丙基酰胺，比起其他的有独特的选择性，然后还解决了氨基柱容易自杀的问题（容易解离产生OH-，破坏硅胶基质）。总体来说我们的HILIC柱具有独特的选择性，寿命长，稳定性好，具体可以看上面第五楼附件！

哇 有各位高人指点 很好的资料！

不错，good，刚刚要用液质做极性药物的药动，C18搞不好没有保留！学习一下了