主题:【求助】正相的色谱系统转换成反相的色谱系统,该注意些什么?

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suiniubei
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  核心就是用异丙醇过渡。

  一、先拆下正相柱。把各个流路都用异丙醇充满,启泵。
  二、至异丙醇完全充满柱子前的管路之后,把反相柱装上。以低流速(0.2~0.3ml/min ) 冲洗反相柱。直到废液管排出的完全为异丙醇。
  三、停泵,把各流路切换成你需要用的反相的流动相。

  把反相切换成正相,也是用异丙醇过渡。
sally0326
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个人觉得主要有两点需要注意:

1、流动相转换
  正相系统和反相系统其实根本的原因是水,因为硅胶遇水会失活,所以主要是考虑替代水相的。因此在转换时,常用异丙醇过度,原因是异丙醇极性适中,正反相都合适;如果没有异丙醇的情况下,可以用甲醇,但是实际可能就需要长一些了,因为甲醇和正己烷的互溶性不是很好!!!

2、仪器性能
  一般液相都是反相体系的,因此材质上考虑的都是反相体系常用材质,所以正相溶剂对其仪器可能会造成影响甚至损坏,更换前一定要仔细厂家其仪器是否适用于正相系统。
例如:氟橡胶,一般泵头都有密封,常用的密封材料为氟橡胶;氟橡胶不耐丙酮和乙酸乙酯等,使用会导致其氟橡胶变性,没有弹性,材料变脆不耐磨。
PEEK:大部分液相都用的PEEK钉,但是PEEK不耐二氯甲烷,因此也需要注意。
workboy
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闫旭
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原文由jiaodandan(jiaodandan)发表:补充一点,若长时间使用,柱塞杆密封垫也需要更换,安捷伦1100/1200泵使用的活塞杆密封垫(石墨填充的,Teflon 材料/反相)
当泵头的底部出现泄漏、保留时间不一致或压力波动不稳定时,应更换泵密封垫。每次更换密封垫时,都应检查活塞杆(推杆)是否有划痕。有划痕的活塞杆会导致轻微渗漏,并可能损坏密封垫

安捷伦1100/1200泵使用的活塞杆密封垫,聚乙烯材料(正相)
请问我得正相流动相是正己烷,如何反相倒成正相呢
夏天的雪
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原文由 闫旭(v2850810) 发表:
请问我得正相流动相是正己烷,如何反相倒成正相呢
先用异丙醇过渡,过渡完之后再用正己烷走流动相,用异丙醇过渡的时候可以将流速调低,否则异丙醇粘度大容易出现压力超过设定上限
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