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主题：【原创】迅速围观大牛的强力分离！！！

浏览0 回复19 电梯直达
nini2006
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发表于：2012/12/21 22:08:59 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
偶然中搜出来的台湾一个组的网页，叫做“生物纳米分析实验室”。他们通过添加纳米金粒子（AuNPs）使DNA实现高通量高效的分离，现介绍如下。

我们知道，DNA的传统分离方法是利用聚合物所形成的网状结构来达到筛分的目的的。但此方不利于同时分离大、小片段的DNA（大片段DNA指碱基对数目在几个kilobase以上的DNA片段）。因为，高浓度聚合物利于小片段DNA的分离，反之低浓度则利于分离大片段DNA。同时，为了分离小片段DNA，则需要增大浓度，但随之背景电解质黏度也随之增大。当需要进行高通量的DNA分析时，聚合物溶液的更换将会大大影响实验结果和进度。

该组的人通过使用纳米金粒子（AuNPs）轻松解决了以上问题。一下为两个例子。

首先，将添加有AuNPs的聚环乙烯（PEO）混合溶液引入毛细管中作为筛分介质进行DNA片段的分离。AuNPs与PEO和DNA作用使得分离度大大提高。此法利用极稀浓度的聚合物溶液就可以得到高解析度的分离结果，低浓度的聚合物溶液因其粘度低，不仅可简单填充毛细管使实验操作难度降低，并且可以大大缩短分离速度。另外，含有AuNPs的聚合物溶液可以保持数月不变质，重现性良好。下图是比较AuNPs对分离DNA片段的影响，样品marker V 跟marker VI的DNA标准样品，碱基对数目从2176 bp到51 bp共有31个片段，由电泳图可知加入AuNPs的PEO溶液，可以得到快速高分辨率的結果（1分钟内20个峰，分辨率可想而知）。



此外，他们在AuNPs的表面修修饰合物分子，称之为AuNPPs。DNA借由与AuNPPs上所修饰的聚合物分子所产生的作用力而分离。为了增加DNA与AuNPPs作用的几率并增加其作用力，他们利用离心的方式浓缩AuNPPs后再配置成适当的浓度进行试验。下图是使用5X AuNPPs分离HMW DNA（從8千多碱基对到4万8千多碱基对，共13个peaks），除了两个8千多的peak没分开之外，其余的大DNA片段都可以在六分半钟内得到分离。

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nini2006
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2012/12/23 16:52:42 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
咕~~(╯﹏╰)b，真尴尬，木有人理，自己顶。
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sunpengwjh
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2012/12/23 20:39:24 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
灰常好！感谢分享！
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strato
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2012/12/25 14:43:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很有幫助的內容
感謝分享!
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strato
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2012/12/25 14:49:44 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
請問這實驗室的詳細資料?
想多了解一下
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阿怪
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2012/12/25 16:02:37 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很好，学习了
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nini2006
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2012/12/25 19:05:27 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 strato(strato) 发表:
請問這實驗室的詳細資料?
想多了解一下
这个实验室，2012年在SCI上发了19篇，2011年27篇，2010年16篇。AC上，他们是常客，更有Angew. Chem，Green Chem，chemical communication……。感兴趣的赶紧点击这里吧：http://www.ch.ntu.edu.tw/~htchang/
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zhq95
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2012/12/26 13:02:23 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常感谢楼主的分享！
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ericwong
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2012/12/27 8:59:14 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做得确实不错。
现在纳米材料似乎越来越多地在各个领域进行了应用，很多都有不错的结果
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雨木霖
mickeylin
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2013/2/1 22:29:06 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
下边的色谱图，才算是称得上色谱么。。。
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beyond1977
xsh6743
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2013/2/27 15:22:42 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
牛叉，不是一般的厉害。
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手机版： 迅速围观大牛的强力分离！！！
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