主题：【求助】GB/T 14929.2-94花生仁、棉籽油、花生油中涕灭威残留量测定方法

原文由 squid123(squid123) 发表:
        该方法的测定原理是：在提取过程中加入强氧化剂使涕灭威、涕灭威亚砜转化为涕灭威砜，然后检测涕灭威砜含量。现在的问题是：1、我做加标实验时，是要加入哪一种物质呢？2、涕灭威、涕灭威亚砜转化为涕灭威砜的反应关系式？主要想知道1g涕灭威能转化为多少g涕灭威砜。3、涕灭威砜能用GC－MS检测出来吗？

这是个很老的方法，以前还真没看到过，不过您不用这么麻烦，用多残留一齐分析法就可以做涕灭威及其二个代谢物，我们这三个都是用LCMS检测的。

花生的做过，用C18除油，回收很好。花生油和棉籽油可能要用GPC+SPE净化才行。

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 squid123(squid123) 发表:
        该方法的测定原理是：在提取过程中加入强氧化剂使涕灭威、涕灭威亚砜转化为涕灭威砜，然后检测涕灭威砜含量。现在的问题是：1、我做加标实验时，是要加入哪一种物质呢？2、涕灭威、涕灭威亚砜转化为涕灭威砜的反应关系式？主要想知道1g涕灭威能转化为多少g涕灭威砜。3、涕灭威砜能用GC－MS检测出来吗？

这是个很老的方法，以前还真没看到过，不过您不用这么麻烦，用多残留一齐分析法就可以做涕灭威及其二个代谢物，我们这三个都是用LCMS检测的。

花生的做过，用C18除油，回收很好。花生油和棉籽油可能要用GPC+SPE净化才行。

请问您用的是哪个方法呢？

雾版说的是日本肯定列表制度的一齐分析法吧。
下面的方法来自日本肯定列表制度的细分分析法。给楼主参考。

涕灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、抗芽威、仲丁威和恶虫威检测方法

1．分析目标化合物
农药成分物质                                分析目标化合物
涕灭威                                        涕灭威
乙硫甲威                                      乙硫甲威
杀线威                                        杀线威
甲萘威                                        甲萘威
抗芽威                                        抗芽威
仲丁威                                        仲丁威
恶虫威                                        恶虫威

2．仪器设备
带柱后衍生荧光检测器的高效液相色谱仪及液相色谱—质谱仪。
3．试剂
除下列试剂外，使用附录2所列试剂。
荧光发生液： 在10mg邻苯二甲醛和5μL 2－巯基乙醇中加入0.05mol／L 硼酸钠溶液至100mL。
磷酸缓冲液：约800mL水中加入1.75g氢氧化钠和11.7g磷酸二氢钠，溶解后，加水至1,000mL。
4．标准品
涕灭威：含涕灭威99％以上，熔点为98℃～100℃。
乙硫甲威：含乙硫甲威99％以上，熔点为33℃～34℃。
杀线威：含杀线威99％以上，熔点为100℃～102℃。
甲萘威：含甲萘威99％以上，熔点为138℃～140℃。
抗芽威：含抗芽威99％以上，熔点为90℃～91℃。
仲丁威：含仲丁威98％以上，熔点为32℃。
恶虫威：含恶虫威99％以上，熔点为129℃～130℃。
5．试验溶液的制备
a 提取方法
① 谷类、豆类、水果、蔬菜、种子类、末茶和啤酒花
谷类、豆类和种子类：将样品粉碎，通过420μm 标准网筛后，称取其10.0g，加入20mL水，放置2小时。
水果和蔬菜：准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量的水，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。
末茶和啤酒花：称取20.0g样品。
加入200mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸，抽滤至磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，滤液合并于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约20mL。
将浓缩液转移至预先加入200mL 5％氯化钠溶液和100mL二氯甲烷(特级)的500mL分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，二氯甲烷层移入500mL三角瓶中。水层中加入100mL二氯甲烷(特级)，按上述同样操作，合并二氯甲烷层于上述三角瓶中。加入适量的无水硫酸钠，不时振摇、混合，放置15分钟后，过滤至磨口减压浓缩器中。再用50mL二氯甲烷(特级) 洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作3次。合并洗涤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。
残留物中加入25mL正己烷和30mL正己烷饱和乙腈溶解，转移至100mL分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入200mL分液漏斗中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，重复2次，合并乙腈层于上述分液漏斗中。加入50mL乙腈饱和正己烷，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层转移至磨口减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解，准确至2mL。
②末茶以外的茶
将9.00g样品浸泡于540mL 100℃水中，室温下放置5分钟后，过滤，移取360mL冷却的滤液于500mL三角瓶中。加入4mL饱和乙酸铅溶液，振荡、混合10秒钟后，用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸抽滤，滤液移入1,000mL分液漏斗。再用50mL丙酮洗涤上述三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物。合并洗涤液于上述分液漏斗中，加入100mL乙醚和100g氯化钠，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，将乙醚层移入300mL三角瓶。水层中加入100mL乙醚，按上述同样操作，合并乙醚层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，过滤至磨口减压浓缩器中。再用30mL乙醚洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作3次。合并洗涤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解，准确至2mL。
b 净化方法
取0.3mL a 提取方法所得的溶液，加入3mL稀盐酸，缓缓摇匀后，用孔径0.45μm的膜滤器过滤，此为试验溶液。
6．操作方法
a 定性试验
① 涕灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、仲丁威和恶虫威的试验
按照下列操作条件进行试验。试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。
操作条件
柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm)
柱： 内径3.9mm、长150mm 不锈钢管。
柱温： 40℃
检测器： 激发波长260nm ，发射波长445nm
流动相：A：四氢呋喃；B：水；C：甲醇。调整流速使涕灭威约12 分钟流出。
浓度梯度： 输送水：甲醇(22：3)混合溶液0.1分钟后，浓度梯度从A：B(1：9)到(3：7)运行19.9 分钟。再输送四氢呋喃：水(3：7)混合溶液10分钟后，输送水：甲醇(22：3)混合溶液10 分钟。
水解槽： 流动相中，注入0.05mol／L 氢氧化钠溶液。保持一定的注入量。
水解槽温度： 80℃
荧光反应槽：流动相中，注入荧光发生液。保持一定的注入量。
② 抗芽威的试验
按照下列操作条件进行试验。用5．试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作为试验溶液，试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。
操作条件
柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm)
柱： 内径4.0--4.6mm、长250mm 不锈钢管。
检测器： 激发波长312nm ，发射波长382nm
流动相：水：甲醇：磷酸缓冲液（1：7：2）混合溶液。调整流速使抗芽威约5分钟30秒钟流出。
b 定量试验
根据与a 定性试验相同的操作条件下所得试验结果，峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
按照以下操作条件，进行气相色谱--质谱仪测定。用5．试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作为试验溶液，试验结果必须与标准品的一致。此外，必要时用峰高法或峰面积法进行定量。
操作条件
柱：内径0.25mm，长30m石英毛细管，涂有0.25μm厚气相色谱用5%苯基--甲基硅酮，老化。
柱温：60℃保持2分钟，此后毎分钟升温15℃。到180℃后保持3分钟。再毎分钟升温8℃，到210℃后，保持2分钟。再以毎分钟升温5℃，到225℃后，毎分钟升温25℃，到280℃后，保持5分钟。
进样器温度：250℃
进样方式： 不分流
气体流量：用氦气作载气，调整流速使涕灭威约5分钟流出。
7．定量限
涕灭威： 0.005 mg/kg；
乙硫甲威： 0.005 mg/kg；
杀线威： 0.005 mg/kg；
甲萘威：无记载；
抗芽威： 0.005 mg/kg；
仲丁威：0.01 mg/kg；
恶虫威： 0.005 mg/kg

谢谢分享资料。目前我使用的仪器是GC-MS，有没有可以用GC-MS检测的方法呢？

原文由 squid123(squid123) 发表:

原文由 DeeperBlue(yangdeyuan) 发表:
雾版说的是日本肯定列表制度的一齐分析法吧。
下面的方法来自日本肯定列表制度的细分分析法。给楼主参考。

谢谢分享资料。目前我使用的仪器是GC-MS，有没有可以用GC-MS检测的方法呢？

日本肯定列表一齐分析法是GC-MS的方法。在我的上传资料里有：http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?searchType=admin_name&keywords=yangdeyuan

涕灭威要和它的二个代谢物一齐检测才有意义。

原文由 DeeperBlue(yangdeyuan) 发表:

原文由 squid123(squid123) 发表:

原文由 DeeperBlue(yangdeyuan) 发表:
雾版说的是日本肯定列表制度的一齐分析法吧。
下面的方法来自日本肯定列表制度的细分分析法。给楼主参考。

谢谢分享资料。目前我使用的仪器是GC-MS，有没有可以用GC-MS检测的方法呢？

日本肯定列表一齐分析法是GC-MS的方法。在我的上传资料里有：http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?searchType=admin_name&keywords=yangdeyuan[/quote]

GC-MS和LC-MS法中都没有涕灭威的测定。是参照GC-MS法同时测涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜吗？

一齐分析法是多残留分析方法。涕灭威是有的啊。

原文由 DeeperBlue(yangdeyuan) 发表:
一齐分析法是多残留分析方法。涕灭威是有的啊。

资料里面唯一提到涕灭威的地方如下：

芥末以外的茶，当测定下表第1栏的农药时，可以采用表中第2栏的细分实验方法。

第1栏                              第2栏

灭除威              涕灭威等检测方法

可是原文并没有提到涕灭威用什么检测方法。

原文由 squid123(squid123) 发表:

原文由 DeeperBlue(yangdeyuan) 发表:
一齐分析法是多残留分析方法。涕灭威是有的啊。

资料里面唯一提到涕灭威的地方如下：

芥末以外的茶，当测定下表第1栏的农药时，可以采用表中第2栏的细分实验方法。

第1栏                              第2栏

灭除威              涕灭威等检测方法

可是原文并没有提到涕灭威用什么检测方法。

文章的意思：茉茶以外的茶可用栏目2的方法（细分法），其他用本方法。本方法是多残留一齐分析。