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液相色谱（LC）
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主题：【求助】HPLC梯度洗脱

浏览0 回复20 电梯直达
sun750470571
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发表于：2013/05/24 15:26:46 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求高人，我做高效液相梯度洗脱，但是峰特别多，怎么也分不开，中药成分多，要做指纹图谱，又要必须把峰分开，求指点办法？着急 ！
该帖子作者被版主 三人行加 2积分， 2经验，加分理由：发帖奖励
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xiaowang268
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2013/5/24 19:47:51 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
呵呵，换柱子，调流动相，一般只能是这样了
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xiaowang268
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2013/5/24 19:56:19 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
当然不会把所有峰都分开的，还是要有所选择的
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三人行
jncxyy2012
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2013/5/24 20:07:50 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以参考一下文献。
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sun750470571
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2013/5/25 9:26:06 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
文献看啦  按文献的更不行  他是做含量的  我是做指纹图谱  所以要尽量把风分开  你们又做这方面梯度洗脱的吗 ？
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有水有渝
xky0230699
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2013/5/25 12:02:43 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
中药梯度洗脱的很多，可以参考药典，做这一类选择高性能的色谱柱也很关键，其它流动相组成、柱温等都可调节，不知道楼主做的是什么，难以提更多的建议。
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sun750470571
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2013/5/25 15:19:56 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
药典是等度洗脱，我的是大连伊力特的色谱柱  甲醇；水（0.01磷酸）  我做的中药丁公藤指纹图谱  大哥给我指点一下
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有水有渝
xky0230699
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2013/5/25 16:17:39 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先你了解丁公藤主要成分及其相关性质吗，想做到所有色谱峰都达到分离度，同时一个波长下检出所有物质是不可能的，所以指纹图谱也是以指标性成分为主要分析对象，如果不知道要分析的样品的组成及性质就无法改进分析方法，建议还是从这方面下手，查资料，改进方法，调整流动相，更换柱效更高的色谱柱
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Sykren
kuangren1193
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2013/5/28 9:47:37 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议换高性能的色谱柱吧，现在国产柱还是比不上进口的啊
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xiaowang268
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2013/5/28 20:23:40 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也要选好柱子的，这个也很重要的
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xiaowang268
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2013/5/28 20:24:13 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
至于流动相和流速，那就要根据情况慢慢试了
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