主题:【讨论】实验完毕后,我们会用甲醇或乙腈冲洗柱子,再用之前还需要再用甲醇或乙腈冲洗吗?

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实验完毕后,我们会用甲醇或乙腈冲洗柱子,再用之前还需要再用甲醇或乙腈冲洗吗?


使用前用流动相配比的纯水+相应有机溶剂 冲洗。然后换上流动相。


流动相配比的纯水+相应有机溶剂?没明白,不是流动相吗?
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实验完毕后,我们会用甲醇或乙腈冲洗柱子,再用之前还需要再用甲醇或乙腈冲洗吗?


使用前用流动相配比的纯水+相应有机溶剂 冲洗。然后换上流动相。


流动相配比的纯水+相应有机溶剂?没明白,不是流动相吗?


因为RP-hplc 一般用磷酸盐缓冲溶液-甲醇(乙腈,四氢呋喃等)作为流动相。一般我们保存RP柱用纯的甲醇或乙腈保存。所以,使用前用流动相配比的纯水+相应的有机溶剂冲洗,再换上流动相。

假如: 0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20, 那么开始用的时候用 纯水-MeOH=80:20  冲洗一段时间,然后再换上0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20。

具体的原因是:避免直接换上流动相,磷酸盐析出使得色谱柱堵塞。
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实验完毕后,我们会用甲醇或乙腈冲洗柱子,再用之前还需要再用甲醇或乙腈冲洗吗?


使用前用流动相配比的纯水+相应有机溶剂 冲洗。然后换上流动相。


流动相配比的纯水+相应有机溶剂?没明白,不是流动相吗?


因为RP-hplc 一般用磷酸盐缓冲溶液-甲醇(乙腈,四氢呋喃等)作为流动相。一般我们保存RP柱用纯的甲醇或乙腈保存。所以,使用前用流动相配比的纯水+相应的有机溶剂冲洗,再换上流动相。

假如: 0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20, 那么开始用的时候用 纯水-MeOH=80:20  冲洗一段时间,然后再换上0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20。

具体的原因是:避免直接换上流动相,磷酸盐析出使得色谱柱堵塞。


但每次用完后,柱子和系统都是用水将盐冲洗掉了啊
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实验完毕后,我们会用甲醇或乙腈冲洗柱子,再用之前还需要再用甲醇或乙腈冲洗吗?


使用前用流动相配比的纯水+相应有机溶剂 冲洗。然后换上流动相。


流动相配比的纯水+相应有机溶剂?没明白,不是流动相吗?


因为RP-hplc 一般用磷酸盐缓冲溶液-甲醇(乙腈,四氢呋喃等)作为流动相。一般我们保存RP柱用纯的甲醇或乙腈保存。所以,使用前用流动相配比的纯水+相应的有机溶剂冲洗,再换上流动相。

假如: 0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20, 那么开始用的时候用 纯水-MeOH=80:20  冲洗一段时间,然后再换上0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20。

具体的原因是:避免直接换上流动相,磷酸盐析出使得色谱柱堵塞。


不过也同意你这种做法,还是保险些的
qingqingcao
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实验完毕后,我们会用甲醇或乙腈冲洗柱子,再用之前还需要再用甲醇或乙腈冲洗吗?


使用前用流动相配比的纯水+相应有机溶剂 冲洗。然后换上流动相。


流动相配比的纯水+相应有机溶剂?没明白,不是流动相吗?


因为RP-hplc 一般用磷酸盐缓冲溶液-甲醇(乙腈,四氢呋喃等)作为流动相。一般我们保存RP柱用纯的甲醇或乙腈保存。所以,使用前用流动相配比的纯水+相应的有机溶剂冲洗,再换上流动相。

假如: 0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20, 那么开始用的时候用 纯水-MeOH=80:20  冲洗一段时间,然后再换上0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20。

具体的原因是:避免直接换上流动相,磷酸盐析出使得色谱柱堵塞。


但每次用完后,柱子和系统都是用水将盐冲洗掉了啊


不要直接上纯水洗涤RP柱子,应该在纯水中加些乙腈或者甲醇。应该知道 C18 是长链,如果纯水洗涤,长链蜷缩,不能够洗涤干净,所以要加入有机相。切记。不然损害色谱柱。

想想相似相容定律。
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qingqingcao
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有有机溶剂,则使得长链舒展。洗涤干净呢。
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qingqingcao
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原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
大家能保证柱子再用之前是冲干净的吗


一般强保留的物质在前面,可以使用反冲方法。但是流速一定要小。对于3.5μm的绝对不能反冲,因为入口处的筛板是5μm的,一冲有可能会把填料冲出来。,所以不能反冲。但是5μm的可以反冲。

保证干净,就是需要用甲醇乙腈好好冲冲。
给力芬
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我们用之前直接上流动相,看下基线怎么样,不过一般要走半个小时左右
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原文由 给力芬(huojuncai) 发表:
我们用之前直接上流动相,看下基线怎么样,不过一般要走半个小时左右

嗯,快的话也就 十多分钟
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