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毛细管电泳（CE）
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主题：【讨论】迁移时间也会作怪？

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rosemarinus
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2013/7/16 10:59:17 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
峰很宽吗，是不是条件不好？
峰型还好，条件是微乳的，优化过的
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rosemarinus
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2013/7/16 11:00:11 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 beyond1977(xsh6743) 发表:
仅仅是保留时间滞后吗？峰宽或半峰宽有没有明显变化，
没什么明显变化，峰面积倒是有减小
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rosemarinus
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2013/7/16 11:16:22 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近仪器故障，暂停实验，所以没注意大家热情的回复，不好意思哦。
我测得是倍半萜类生物碱成分，分子量在850-900，这些生物碱pH 6.0下似乎不带电，我用的是MEEKC模式（正丁醇、乙酸乙酯、乙醇、磷酸盐缓冲 pH 8.5）。两针间均用水碱水冲洗5Min，迁移时间均延长，峰面积有时减小，有时增大1/3左右。管子活化后再做，没有改善，所以觉得是吸附问题，但不想用涂层管。文献大多解决的是大分子蛋白的吸附问题，未找到我遇到的这个问题，所以请教大家，帮我支支招。
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ericwong
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2013/7/16 12:53:38 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做毛细管电泳，还要像LC一样，进样要打针吗？
两次进样之间，冲洗的溶液的顺序是什么？
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nini2006
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2013/7/17 1:15:46 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
MEEKC是微乳电动色谱，跟胶束电动色谱（MEKC）是有区别的。你用那么多有机溶剂，难怪重现性不好。如果你非要用那么多有机溶剂，建议你现配现用，不要久留。否则有机溶剂挥发，浓度改变，重现性当然差了。
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2013/7/17 1:26:25 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lkqzpp(lkqzpp) 发表:
是否可以尝试加动态涂层或使用极端pH以减少吸附
没做过动态涂附，但是似乎可操作性不是很高，但是好混文章，所选的涂附材料很关键。
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2013/7/19 15:23:16 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
MEEKC是微乳电动色谱，跟胶束电动色谱（MEKC）是有区别的。你用那么多有机溶剂，难怪重现性不好。如果你非要用那么多有机溶剂，建议你现配现用，不要久留。否则有机溶剂挥发，浓度改变，重现性当然差了。
乙醇是作为添加剂使用的，其余的是微乳必须的啊，而且含量不多，总共也就占8%，我觉得不是这个问题
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rosemarinus
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2013/7/19 15:24:44 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 lkqzpp(lkqzpp) 发表:
是否可以尝试加动态涂层或使用极端pH以减少吸附
没做过动态涂附，但是似乎可操作性不是很高，但是好混文章，所选的涂附材料很关键。
那一般会选什么材料呢？
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2013/7/19 15:25:58 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 lkqzpp(lkqzpp) 发表:
是否可以尝试加动态涂层或使用极端pH以减少吸附
没做过动态涂附，但是似乎可操作性不是很高，但是好混文章，所选的涂附材料很关键。
那一般是根据什么条件，选什么材料呢
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2013/7/19 15:30:13 21楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ericwong(ericwong) 发表:
做毛细管电泳，还要像LC一样，进样要打针吗？
两次进样之间，冲洗的溶液的顺序是什么？
不是的，进针是我习惯说的，CE的进样，有压力、电动进样等。如果样品成分较为复杂，本人习惯在两次进样间，用水碱水各冲2-3min，一般的样品就没这么做。
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