主题：【求助】液相C18的新柱子

1.（不接柱子）准备新鲜超纯水及色谱级乙腈或甲醇，冲洗色谱仪器系统15-20min，保证仪器系统管路干净。（新柱老化前，此步决不可忽略）

2.（连接柱子）用水-有机相（10：90～5:95），以0.3～0.6ml/min流速冲洗2h以上[或在120min内以水-有机相（95:5→0:100）梯度变化，以0.3～0.6ml/min流速冲洗]→再用100%有机溶剂，以0.3～0.6ml/min流速冲洗1h以上→最后用100%有机溶剂，以1ml/min流速冲洗1h以上。（目的是老化色谱柱）

3.    在平衡前根据水相-有机相的比例，首先调整水-有机相的比例接近流动相水相-有机相的比例，以1ml/min流速冲洗30左右（目的是相平衡过渡）。如果流动相中含有缓冲盐，决不可在柱老化后立即用流动相平衡，必需先用90%以上水进行预平衡30min以上，否则，会导致缓冲盐在柱内析出结晶，严重时会将新柱永久不可逆地损坏。

4.    由于是新柱首次使用，在进样完成后需立即对色谱柱进行净化和有机溶剂饱和。方法是：用水-有机相（90：10～95:5），以0.6ml/min流速冲洗1h以上→再用水-有机相（90：10～95:5），以1ml/min流速冲洗30min以上（或者采用溶剂梯度变化至100%有机相冲洗120min以上）→最后用100%有机溶剂，以1ml/min流速冲洗1h以上。若流动相中有缓冲盐，建议用100%水冲洗1h以上后，再重复上述净化程序。

5.    在新色谱柱使用几次，均正常后，运行完毕净化处理程序可简化为：用水-有机相（90：10～95:5），以1ml/min流速冲洗1h以上→再用100%有机溶剂，以1ml/min流速冲洗30min以上→选择柱说明书中保存条件（Storage Conditions）规定的保存溶剂（Storage Solvent）冲洗10倍柱体积以上→封口，保存。

原文由 武灵(zhonghuashendun) 发表:

原文由 石头记忆(zzip203) 发表:

原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:

新柱的处理：每次新买的柱子虽然是经厂家测试过并密封好的，可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了，因此，每拿到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。首先，是配制好65%的乙腈/水，再把色谱柱正确的连接在色谱仪上，出口放空（注意：出口端切不可连上检测器，以免污染了检测器），以低流速0.1ml/min~0.5ml/min（如果是LC/MC 柱子，则应以0.3 ml/min 进行）均可，不可以高流速进行，等看见柱子出口有液体流出后，过20 分钟后再接上检测器，以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min（如果是LC/MC 柱子则应以0.3 ml/min 进行），继续冲洗2~8 小时。

要求这么高啊，我们都是直接用1ml/min的甲醇直接冲过去的，也没有放空，也没有发现有什么影响！

呵呵，来的有点猛烈。不过三人行老师说的很对，最好还是低流速，先放空。预防为主嘛，出问题了就摊上大事了。

可能是我有点太粗暴了，哈哈！玩仪器要的是胆大心细啊

原文由 石头记忆(zzip203) 发表:

原文由 武灵(zhonghuashendun) 发表:

原文由 石头记忆(zzip203) 发表:

原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:

新柱的处理：每次新买的柱子虽然是经厂家测试过并密封好的，可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了，因此，每拿到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。首先，是配制好65%的乙腈/水，再把色谱柱正确的连接在色谱仪上，出口放空（注意：出口端切不可连上检测器，以免污染了检测器），以低流速0.1ml/min~0.5ml/min（如果是LC/MC 柱子，则应以0.3 ml/min 进行）均可，不可以高流速进行，等看见柱子出口有液体流出后，过20 分钟后再接上检测器，以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min（如果是LC/MC 柱子则应以0.3 ml/min 进行），继续冲洗2~8 小时。

要求这么高啊，我们都是直接用1ml/min的甲醇直接冲过去的，也没有放空，也没有发现有什么影响！

呵呵，来的有点猛烈。不过三人行老师说的很对，最好还是低流速，先放空。预防为主嘛，出问题了就摊上大事了。

可能是我有点太粗暴了，哈哈！玩仪器要的是胆大心细啊

确实需要胆大心细，要敢动手，但又要加倍小心。

柱子有使用说明书的

一般的做法就是用甲醇或乙腈小流速冲上几个小时，就oK了