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主题：【已应助】关于色谱峰峰高的问题

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erge
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发表于：2013/08/02 23:36:38 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请教各位老师，做色谱分析时，色谱峰的峰高一般在什么范围比较合适呢？比如外标法测含量时，DAD检测器，那对照品的峰高多少合适呢？太浓了肯定不行，太稀呢？有没有谁研究过啊？药典或法规有提到过这样的问题吗？
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2013/8/3 7:58:26 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好像没有固定范围，塔板数、分离度、对称因子等合格就可以了
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lihouquan
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2013/8/3 22:45:31 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
即使这些都达到要求，峰高1000和2000测得的结果还是有差别的吧？
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xiaowang268
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2013/8/4 11:40:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 erge(lihouquan) 发表:
即使这些都达到要求，峰高1000和2000测得的结果还是有差别的吧？


这个主要是要在线性范围之内的
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xiaowang268
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2013/8/4 11:40:48 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于峰高，好像没有特定的要求的
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erge
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2013/8/5 21:55:39 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
原文由 erge(lihouquan) 发表:
即使这些都达到要求，峰高1000和2000测得的结果还是有差别的吧？


这个主要是要在线性范围之内的


那如果用外标法定量每次都要做线性？
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xiaowang268
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2013/8/6 22:13:02 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 erge(lihouquan) 发表:
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
原文由 erge(lihouquan) 发表:
即使这些都达到要求，峰高1000和2000测得的结果还是有差别的吧？


这个主要是要在线性范围之内的


那如果用外标法定量每次都要做线性？


不要的，只要检测浓度在线性范围就可以啊，线性做一次就知道了啊
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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2013/8/7 10:53:21 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 erge(lihouquan) 发表:

请教各位老师，做色谱分析时，色谱峰的峰高一般在什么范围比较合适呢？比如外标法测含量时，DAD检测器，那对照品的峰高多少合适呢？太浓了肯定不行，太稀呢？有没有谁研究过啊？药典或法规有提到过这样的问题吗？


做分析，一般有两种：定量与定性。做色谱分析，同样有两种。

色谱峰首先的作用是定性。如果是定性分析，峰高低差异不大，但如果过大或者过小，还是有问题：过大，如果干扰峰干扰要判定峰，则出现假阴性；过小，则检测不到色谱峰，同样也是假阴性。一般是要规定上样量，用体积或者某种物质的量的。

色谱峰还有一个特性：与物质量有相关性，这个是用于定量的基础。做定量分析，则在方法开发时，要做方法学验证，其中有标准曲线范围，这里规定了上限和下限。如果被检样品中目的物质含量过高或者过低，则响应值/色谱峰高/色谱峰面积会超出这个标准曲线的上下限，则无法计算，需要重新处理样品，如稀释或者浓缩。一般过低，就不再处理，直接报“NA”或者未检出。
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2013/8/7 22:26:23 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那做个线性就可以了？
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tianru的爸爸
lxdongzi2003
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2013/8/8 10:46:20 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 erge(lihouquan) 发表:

那做个线性就可以了？


在确定方法时是要做方法学验证的；

在定量方法学验证时，线性范围是必须要做的，但并不只做这一个，还有其它。
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zhoujin83
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2013/8/8 13:48:27 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做含量时，不光是要在线性范围内。因为含量方法一般出峰都比较快（相对于有关物质方法），所以有时候和有些杂质的分离度可能不是特别好，如果峰比较高的话就可能包含了一些小峰进去，同时为了保证峰面积的精密度，一般含量方法的峰高在400mAU，面积3000左右。
    所以，含量，包括光学异构分析方法一般选择高波长，为的是屏蔽高波长下没有吸收的物质的干扰。
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