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主题：【讨论】天气转凉别忘了给ELISA试剂盒保温

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hysw
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发表于：2013/11/12 15:21:02 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在ELISA试剂盒实验中每一个步骤都至关重要，其中的温育是在试剂盒实验中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和 2～8℃。
    保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜笼盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。ELISA试剂盒若用保温箱，应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将ELISA板放在湿纱布上。应留意温育的温度和时间应按划定力求正确。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成最多的沉淀。室温温育的反应，操纵时的室温应严格限制在划定的范围内，尺度室温温度是指20～25℃，详细操纵时可根据仿单的要求控制温育。
    要保证在设定的温度下有足够的反应时间，一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温 升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔 板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。因此，为保证37℃下足够的温育时间，临 床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。
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2013/11/19 8:12:44 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多数试剂需要低温保存，如此高的温度不常见。
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2013/11/19 9:38:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 平凡人(zhaoyt1979) 发表:

多数试剂需要低温保存，如此高的温度不常见。


这是在操作ELISA试剂盒实验温育步骤时需要的温度，一般保存的话就是2-8度
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2013/11/19 19:17:17 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hysw(hysw) 发表:
原文由 平凡人(zhaoyt1979) 发表:

多数试剂需要低温保存，如此高的温度不常见。


这是在操作ELISA试剂盒实验温育步骤时需要的温度，一般保存的话就是2-8度


操作时要在恒温箱内进行了。
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