原文由 zhoujin83(zhoujin83) 发表:
选缓冲盐要考虑以下几点:
1. 所选缓冲盐的缓冲范围是否包含需要的pH。比如你需要pH4.0的流动相,如果你选择了磷酸二氢钾,那么磷酸二氢钾在这个pH值是没有缓冲能力的,不太好。
2. 所选用的缓冲盐是否有吸收,会不会造成基线波动。比如选用了醋酸盐,而你的波长为220nm,那么基线噪声会很大,走梯度时基线漂移会很严重。
3. 一般情况下,缓冲盐的浓度从5mM-25mM就足够了,但是某些物质,能在流动相中电离,造成拖尾或出双峰,增加缓冲盐浓度能抑制这种电离,就能得到较好的色谱图。
4. 弱酸弱碱盐具有“弱离子对”的作用(这个弱离子对是我同事提出的,是一个形象的说法,不一定对),具有一定的选择性,如果其他条件都满足的话,更换缓冲液也许能提高分离度。比如我曾经有个方法,缓冲盐是醋酸铵,pH是4.0,有一个物质始终不能达到很好的分离,将缓冲盐换为甲酸铵后这个问题就解决了。
5. 据菲罗门公司说,常用缓冲液中,磷酸体系最伤柱子,挥发性盐会好一些。
这是我的一点经验,其他坛友请补充。
原文由 生活就这么美好(xiaowang268) 发表:原文由 我爱分析(v2814416) 发表:
如果你的被测物已经在流动相中全部变成分子了,那就不用调缓冲盐了。调缓冲盐是为了你的混合物体系均是部分解离的,而这些化合物无论全调成分子或全调成离子,都不能分好的分开,这是你需要挑一个PH值,是他们有的是分子,有的是离子,而为了确保该流动相的稳定性,需要向其中家一定的缓冲盐来保证他的PH值。
说白了就是让流动相的PH值稳定
是他们有的是分子,有的是离子?应该是全部以分子或全部以离子形式存在吧?