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主题：【讨论】色谱柱再生

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Ethon
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发表于：2013/12/05 20:55:21 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平时柱子是反相色谱法检测色素，C18（ODS）柱子，刚做了一次色谱柱再生，耗时约3个小时，感觉没什么变化不知道是不是再生时间不够，是做如下处理：甲醇↔异丙醇↔四氢呋喃 1ml/min

网上还有一些说法再生包括活化和和净化两个步骤：

对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。再生处理包括活化(右→左)和净化(左→右)两种。硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱按下列顺序冲洗:三甲基戊烷或三氯乙烷丙酮←→乙醇←→水。键合相硅胶柱:蒸馏水甲醇(冲洗过程中可加入少量二甲基甲酰胺)。离子交换树脂]柱:高浓度的NaCl溶液(1-2molL的NaCl溶液)可使大部分树脂再生,油脂等少数与树脂紧密结合的物质可用低浓度碱溶液(如0.1molL的NaOH溶液)冲洗,酸性有机物吸附在固定相的用低pH缓冲液冲洗,碱性有机物用高pH缓冲液冲洗,然后再用蒸馏水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸馏水冲洗。凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶]处理可分解凝胶中剩余的痕量胃蛋白酶,然后再用蒸馏水←→甲醇←→蒸馏水冲洗。

不知道大家柱子再生是怎么处理，效果怎么样的，色谱柱再生需要柱子反向吗？大家都来谈谈吧！！！！！
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nixiaolong
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2013/12/6 8:53:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人也做过色谱柱再生，感觉没效果，就加了个保护住，经常更换保护住还是比较经济实用的。你做色素，用聚酰胺粉吸附净化，效果蛮好的，柱效下降应该没那么快
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支点
zhx_fs_ln
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2013/12/6 12:28:34 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
C18柱再生也只是一时权宜，尽量不反接，压力会很大。其他有的柱子可以反接，我用过的钙柱就是。
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zhaohua8011
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2013/12/6 13:19:30 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
论坛上色谱柱再生的方法很多，可以借鉴！
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e_liang369
v2821515
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2013/12/9 16:59:01 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
再生再生无非就是冲洗一些难洗脱物质，有人就认为再生可以解决一切
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武灵
zhonghuashendun
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2013/12/12 8:37:24 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果是键合相（比如说键合上去的C18）被水解掉了，再生也没用的。
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