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凝胶色谱（GPC）
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主题：【讨论】小分子与蛋白质的偶联物

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承xia
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发表于：2013/12/20 11:20:04 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不知有谁用色谱做过小分子与蛋白质的偶联物的相关实验？就是检测偶联上没有的那种？
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2013/12/20 12:21:05 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没做过这方面的分析，个人理解，你能判断下你这物质的分子量吗？先选择合适溶剂，是水相？水做溶剂，需要加盐吗？在水相的色谱柱是否有保留，选择合适分子量范围的柱子，用什么检测器能检测到。
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tigertooth
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2013/12/20 15:40:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
小分子，分子有多小？
有一种可能，但不一定都适合。蛋白是球状的，接上某些东西后，发生了构象变化，用SEC柱测的时候可能出峰提前。从侧面可以印证。
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承xia
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2013/12/20 16:46:04 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
小分子是唾液酸，Neu5Ac，分子量300多点。蛋白质BSA,球状的。用GPC做的话，偶联物和未偶联的BSA出峰时间相差很少，不好区别是连上还是没有连上。很纠结啊。用紫外检测的话，步骤很多，很麻烦。
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小不董
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2013/12/22 14:19:58 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是否可以考虑用液质呢。但最好还是能找到能分离你这物质的柱子和条件
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histone1
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2013/12/24 11:57:48 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分子量太小了，BSA单体67k，连上个300多的物质，几乎看不到。
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