主题：【分享】转载——实验室防治污染篇

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发表于：2013/12/27 14:23:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

实验操作中如何避免污染

　污染是很多生物实验室中细胞培养、细菌培养的噩梦，本人从事培养多年，有些体会，跟大家分享。其实在接种过程中很多规则都是常识，例如紫外杀菌、接种前洗手等等，不再这里重复。但是有一些小细节，却可能是大家忽略的，但是往往恰恰是污染的原因：

　　1、首先，最重要的接种室灭菌一定不要省。再高效的超净台也未必保证完全超净。而且当我们操作的时候，手要伸进超净台，可能把菌就带进去啦。如果接种室消毒了，就大大减少了这种机会。其实做法很简单，就是用灭菌水(没有灭菌水用70%酒精)喷到空气中，密集的细小液珠粘着菌落到地上，空气就干净了。最极端的例子是我们实验室曾经超净台坏了，空气灭菌后在空气里直接接种昆虫细胞(没有任何抗生素)，都没污染。

　　2、操作一定要快。可能整个超净台中就那么两三个菌，随着空气蜗旋，落在瓶子里，就倒霉了，速度快就大大减少污染概率。

　　3、特别注意瓶口灭菌。我们常见的做法是对瓶子放进超净台前用酒精喷一下，但是瓶口位置要特别多喷一些，因为接种塞子一拔一塞，最容易把菌带进瓶子里。

　　4、超净台一定要空，因为紫外只能表面杀毒，装太多东西就容易污染。

　　5、枪头要用酒精喷一下，因为常常会把枪头伸进瓶内接种，就算不接触瓶壁，也难免表面上粘得菌落到瓶里。

【分享】实验室的污染与防治

实验室的污染与防治

　　摘要：本文分析了目前我国实验室存在的污染种类及危害，阐明实验室是一种不容忽视的污染源，其污染种类复杂，毒害较大。并针对不同污染提出相应治理办法。同时借鉴国际上相关的管理经验，提出对实验室污染防治措施，推行绿色实验室。

　　关键词：实验室;废弃物;环境污染;治理

　　随着我国科学技术的发展，对各类实验室的需求越来越多，各学科的重点实验室、各学校、各系统内的重点实验室层出不穷。从实验室的分布来看，主要集中在学校(包括各高等院校和中学学校)、科研机构、检测机构和企业中的检验研究部门。企业实验室的污染问题可归纳为企业的环保问题，易于被各级部门重视，企业在处理自身的环保问题时，污染问题也得到相应的处理。而各类实验室多为相对独立的行政单位，区域分散，单个污染少，易于被忽视。

　　我国目前拥有各类高等院校1100所(1999年统计数字)，普通高中1.5万所，初中6.3所。科研院所、质检、卫生防疫、环境监测、农林等各级检验机构近20000余个，已成为一个庞大的系统。实验室实际上是一类典型的小型污染源，建设的越多，污染的越大。这些实验室，尤其是在城区和居民区的实验室对环境的危害特别大，因为很多实验室的下水道与居民的下水道相通，污染物通过下水道形成交叉污染，最后流入河中或者渗入地下，其危害不可估量。科学工作者或者未来的科学工作者成了环境的污染者，令人十分遗憾。环境保护是事关可持续发展经济的大战略。在环保面前人人平等，必须本着“谁污染环境，谁负责处理”的原则贯彻执行。实验室的成本核算和对外收费都应包括实验室的环保费用在内。

　　实验室的污染源种类复杂，品种多，毒害大，应根据具体情况，分别制订处理方案。

　　1 实验室环境污染种类及危害[1]

　　1.1 按污染性质分

　　1.1.1化学污染

　　化学污染包括有机物污染和无机物污染。有机物污染主要是有机试剂污染和有机样品污染。在大多数情况下，实验室中的有机试剂并不直接参与发生反应，仅仅起溶剂作用，因此消耗的有机试剂以各种形式排放到周边的环境中，排放总量大致就相当于试剂的消耗量。日复一日，年复一年，排放量十分可观。有机样品污染包括一些剧毒的有机样品，如农药、苯并(α)芘、黄曲霉毒素、亚硝胺等。无机物污染有强酸、强碱的污染，重金属污染，氰化物污染等。其中汞、砷、铅、镉、铬等重金属的毒性不仅强，且有在人体中有蓄积性。

　　1.1.2生物性污染

　　生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染。生物废弃物有检验实验室的标本，如血液、尿、粪便、痰液和呕吐物等;检验用品，如实验器材、细菌培养基和细菌阳性标本等。开展生物性实验的实验室会产生大量高浓度含有害微生物的培养液、培养基，如未经适当的灭菌处理而直接外排，会造成严重后果。生物实验室的通风设备设计不完善或实验过程个人安全保护漏洞，会使生物细菌毒素扩散传播，带来污染，甚至带来严重不良后果。2003年非典流行肆虐后，许多生物实验室加强对SAS病毒的研究，之后报道的非典感染者，多是科研工作者在实验室研究时被感染的。

　　1.1.3 放射性污染物

　　放射性物质废弃物有放射性标记物、放射性标准溶液等。

　　1.3 按污染物形态分

　　1.3.1 废水

　　实验室产生的废水包括多余的样品、标准曲线及样品分析残液、失效的贮藏液和洗液、大量洗涤水等。几乎所有的常规分析项目都不同程度存在着废水污染问题。这些废水中成分包罗万象，包括最常见的有机物、重金属离子和有害微生物等及相对少见的氰化物、细菌毒素、各种农药残留、药物残留等。

　　1.3.2 废气

　　实验室产生的废气包括试剂和样品的挥发物、分析过程中间产物、泄漏和排空的标准气和载气等。通常实验室中直接产生有毒、有害气体的实验都要求在通风橱内进行，这固然是保证室内空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp]气质量[/url]、保护分析人员健康安全的有效办法，但也直接污染了环境空气。实验室废气包括酸雾、甲醛、苯系物、各种有机溶剂等常见污染物和汞蒸汽、光气等较少遇到的污染物。

　　1.3.3 固体废物

　　实验室产生的固体废物包括多余样品、分析产物、消耗或破损的实验用品(如玻璃器皿、纱布)、残留或失效的化学试剂等。这些固体废物成分复杂，涵盖各类化学、生物污染物，尤其是不少过期失效的化学试剂，处理稍有不慎，很容易导致严重的污染事故。

　　2 对实验室污染物的处理办法

　　为防止实验室的污染扩散，污染物的一般处理原则为：分类收集、存放，分别集中处理。尽可能采用废物回收以及固化、焚烧处理，在实际工作中选择合适的方法进行检测，尽可能减少废物量、减少污染。废弃物排放应符合国家有关环境排放标准。

　　2.1 化学类废物

　　一般的有毒气体可通过通风橱或通风管道，经空气稀释排出。大量的有毒气体必须通过与氧充分燃烧或吸收处理后才能排放。

　　废液应根据其化学特性选择合适的容器和存放地点，通过密闭容器存放，不可混合贮存，容器标签必须标明废物种类、贮存时间，定期处理。一般废液可通过酸碱中和、混凝沉淀、次氯酸钠氧化处理后排放，有机溶剂废液应根据性质进行回收。

　　2.1.1 含汞废液的处理

　　排放标准3：废液中汞的最高容许排放浓度为0.05mg/L(以Hg计)。

　　处理方法：①硫化物共沉淀法：先将含汞盐的废液的pH值调至8-10，然后加入过量的Na2S，使其生成HgS沉淀。再加入FeS04(共沉淀剂)，与过量的S2-生成FeS沉淀，将悬浮在水中难以沉淀的HgS微粒吸附共沉淀.然后静置、分离，再经离心、过滤，滤液的含汞量可降至 0.05mg/L以下。[2]

　　②还原法：用铜屑、铁屑、锌粒、硼氢化钠等作还原剂，可以直接回收金属汞。

　　2.1.2 含镉废液的处理

　　①氢氧化物沉淀法：在含镉的废液中投加石灰，调节pH值至10.5以上，充分搅拌后放置，使镉离子变为难溶的Cd(OH)2沉淀.分离沉淀，用双硫腙分光光度法检测滤液中的Cd离子后(降至0.1mg/L以下)，将滤液中和至pH值约为7，然后排放。

　　②离子交换法：利用Cd2+离子比水中其它离子与阳离子交换树脂有更强的结合力，优先交换.

　　2.1.3 含铅废液的处理

　　在废液中加入消石灰，调节至pH值大于11，使废液中的铅生成Pb(OH)2沉淀.然后加入Al2(S04)3(凝聚剂)，将pH值降至7-8，则Pb(OH)2与Al(OH)3共沉淀，分离沉淀，达标后，排放废液。

　　2.1.4 含砷废液的处理

　　在含砷废液中加入FeCl3，使Fe/As达到50，然后用消石灰将废液的pH值控制在8-10。利用新生氢氧化物和砷的化合物共沉淀的吸附作用，除去废液中的砷。放置一夜，分离沉淀，达标后，排放废液。

　　2.1.5 含酚废液的处理

　　酚属剧毒类细胞原浆毒物，处理方法：低浓度的含酚废液可加入次氯酸钠或漂白粉煮一下，使酚分解为二氧化碳和水。如果是高浓度的含酚废液，可通过醋酸丁酯萃取，再加少量的氢氧化钠溶液反萃取，经调节pH值后进行蒸馏回收.处理后的废液排放。

　　2.1.6 综合废液处理

　　用酸、碱调节废液PH为3-4、加入铁粉，搅拌30min，然后用碱调节p H为9左右，继续搅拌10min，加入硫酸铝或碱式氯化铝混凝剂、进行混凝沉淀，上清液可直接排放，沉淀于废渣方式处理。

　　2.2 生物类废物

　　生物类废物应根据其病源特性、物理特性选择合适的容器和地点，专人分类收集进行消毒、烧毁处理，日产日清。

　　液体废物一般可加漂白粉进行氯化消毒处理。固体可燃性废物分类收集、处理、一律及时焚烧。固体非可燃性废物分类收集，可加漂白粉进行氯化消毒处理。满足消毒条件后作最终处置。

　　2.2.1 一次性使用的制品如手套、帽子、工作物、口罩等使用后放入污物袋内集中烧毁。

　　2.2.2 可重复利用的玻璃器材如玻片、吸管、玻瓶等可以用1000-3000mg/L有效氯溶液浸泡2-6h.然后清洗重新使用，或者废弃。

　　2.2.3 盛标本的玻璃、塑料、搪瓷容器可煮沸15min.或者用1000mg/L有效氯漂白粉澄清液浸泡2-6h，消毒后用洗涤剂及流水刷洗、沥干;用于微生物培养的，用压力蒸汽灭菌后使用。

　　2.2.4 微生物检验接种培养过的琼脂平板应压力灭菌30min，趁热将琼脂倒弃处理。

　　2.2.5 尿、唾液、血液等生物样品，加漂白粉搅拌后作用2-4h，倒入化粪池或厕所。或者进行焚烧处理。

　　2.3 放射性废弃物

　　一般实验室的放射性废弃物为中低水平放射性废弃物，将实验过程中产生的放射性废物收集在专门的污物桶内，桶的外部标明醒目的标志，根据放射性同位素的半衰期长短，分别采用贮存一定时间使其衰变和化学沉淀浓缩或焚烧后掩埋处理。

　　2.3.1 放射性同位素的半衰期短(如：碘131、磷32等)的废弃物，用专门的容器密闭后，放置于专门的贮存室，放置十个半衰期后排放或者焚烧处理。

　　2.3.2 放射性同位素的半衰期较长(如：铁59、钻60等)的废弃物，液体可用蒸发、离子交换、混凝剂共沉淀等方法浓缩，装入容器集中埋于放射性废物坑内。

　　3 解决实验室污染的措施

　　3.1 提高认识，制定技术规范

　　各级实验室都需要进一步提高对实验室环境污染问题的认识，不能回避，听之任之，而是应该根据本实验室工作的特点、重点，积极探索，想方设法减少实验室污染。国家有关部门也应认真研究实验室的污染特点和防治途径，提出操作性强、简便实用的技术规范，并出台相应的考核要求及办法。最好是融入实验室的建设和验收中去，使之成为能力建设的一部分，从而有利于贯彻落实各项实验室环境污染的防治措施。

　　3.2 建立实验室环境管理体系[3]

　　实验室在能力建设、质量管理的同时，还要建立完备的实验室环境管理体系。按照ISO14001环境管理体系的理念和要求，全面考察实验分析的各个方面，制定相应的程序文件，规范实验室环境行为，充分贯彻ISO14001一贯强调的污染预防和持续改进的基本要求，力争减小每一个过程的环境影响，从而不断提升实验室管理水平。

　　3.3 全面推行绿色化学、清洁实验

　　3.3.1 选择污染少的分析方法

　　在保证实验效果的前提下，用无毒害、无污染或低毒害、低污染的试剂替代毒性较强的试剂，尽量用无毒、低毒试剂替代高毒试剂。在一些特定实验要用到高毒性药品时，一定要用封闭的收集桶收集废液。

　　学校在进行教育实验中，还要特别注意发挥教学多媒体的作用。教学多媒体是知识经济的产物，它是信息社会的标志之一，在实验教学中，计算机辅助教学模拟化学实验(仿真实验)是一种化学试剂和仪器装置“零投入”和“废弃物零排放”的特殊实验方式，它非常适合于演示实验。因为演示实验主要是用于培养学生的观察能力和用于模仿而不是训练动手操作能力的。某些毒害较大的化学实验也可以采用这种方式，从而可防止为了学习一点儿知识而付出高昂的环境代价的作法。[4]

　　3.3.2 改进实验条件，开展推广微型实验[5]

　　在实验中改善实验装置，是有效防止有毒气体逸散、有毒液体外溢的重要举措。一些商品化实验装置的产生可以大大减少实验中化学试剂的用量。

　　微型实验是指在微型化的仪器装置中进行的实验，其试剂用量是常规实验的数十分之一至千分之一。因此，开设微型实验，是节约药品，减少开支，降低实验污染的简便方法。

　　改进实验方法，可以减少试剂使用量。在农残检测中利用固相萃取取代传统的液液萃取，可以大大减少乙腈等有毒试剂的使用，减少污染。

　　3.3.3 成立试剂调度网络

　　过期、失效的化学试剂的处理是世界性的难题。各实验室可以合作成立区域性的试剂调度网，选择一部分危害大，用量少，易失效的试剂进入网络，实行实验室间资源共享，尽量避免大批化学试剂失效，也可节约实验成本。

　　3.3.4 加强地区中心实验室的功能

　　现行的管理体制使各级行政部门都拥有各自小而全的实验室，既浪费了大量资源，又不利于环境保护。应发挥地区中心实验室的作用，集中部分项目，对社会开发。从而达到资源共享，相对降低实验室污染物的排放，对污染相对大的实验室有利于集中治理。

　　3.3.5 一些行之有效的清洁实验行为的实例

　　·在满足实验要求的情况下，适当降低采样量;

　　·不要购买暂时用不上的试剂;

　　·尽量利用可回收的试剂;

　　·应使用可降解的无磷洗涤剂;

　　·使用酒精温度计从而避免水银温度计可能带来的汞污染。

　　4 国内外实验室污染治理的现状

　　在国外，有专门的实验室废弃物处理站来集中收集处理。实验室废弃物集中处理站的管理规范、严格，安全环境保护意识极强。专门地点集中、专门房间、专门容器存放，专门人员管理，严格分区、分类，集中送特殊废品处理场处理。各种废弃物由各实验室分类上交后，处理站要对交来废弃物称重后将信息存进计算机，再分类放到规定地方集中。例如，报废放射源、废机油、报废化学试剂、化学合成“三废物”、化学品废弃容器等都分类存放。[6]

　　废弃物集中处理站设计内容周密，设施完备先进，安全可靠。为防止集中后的地下渗漏二次污染，设计时将处理站地下全部用水泥整体浇注。危险化学品、放射源存放在专门房间，还有安全监控、排风系统。

　　废弃物集中处理站的费用由政府每年的经费预算中列支。另一方面，可回收废品被收购后所得资金则用于废弃物集中处理站的进一步发展。

　　目前我国对实验室的污染排放并没有专门的规定，一般参照企业的污染排放标准。实验室在建设或认可验收时会对实验室的废弃物排放提出要求。如气体实验在通风处做，废弃物由专门的环保公司回收等。由于实验室污染种类齐全，情况复杂，多数项目产生的污染量较小，缺乏相应资金，操作起来存在着相当难度，给污染治理带来一定困难。目前除少数一些环保意识强的实验室，没有直接排放废弃物外，多数实验室仅仅把环保放在口头上，废弃物回收协议签在纸上，大量的废弃物仍然直接排放。

　　由于实验室大多数项目只是零星开展，各项目之间的工作频次不均匀，废弃物排放物规律，污染分散，这些也给环保部门监控带来困难。一些环保措施的后处理没有完善，如残液缸满后如何处理，都是一个棘手的问题。

　　5 结论

　　实验室存在着明显的环境污染，国家有关部门必须完善管理制度，研究解决办法，采取有效措施，努力避免实验室的三废污染。政府部门也应给予资金、政策的支持，建立全面、系统的治理方案，逐步推行，采用合适的方式来妥善处理废弃物，力争问题的最终解决

实验室“三废”的处理

实验过程中产生的废气、废液、废渣大多数是有害的，必须经过处理才能排放。

　　(一)废气的处理

　　少量有毒气体可以通过排风设备排出室外，被空气稀释。毒气量大时，必须处理后再排出。如氧化氮、二氧化硫等酸性气体用碱液吸收。可燃性有机废液可于燃烧炉中通氧气完全燃烧。

　　(二)含酚、氰、汞、铬、砷的废液处理

　　低浓度含酚废液加次氯酸钠或漂白粉使酚氧化为二氧化碳和水。高浓度含酚废水用乙酸丁酯萃取，重蒸馏回收酚。

　　含氰化物的废液用氢氧化钠溶液调至pH10 以上，再加入3% 的高锰酸钾使CN- 氧化分解。CN-含量高的废液用碱性氯化法处理，即在pH10以上加入次氯酸钠使CN-氧化分解。

　　含汞盐的废液先调至pH8~10，加入过量硫化钠，使其生成硫化汞沉淀，再加入共沉淀剂硫酸亚铁，生成的硫化铁将水中的悬浮物硫化汞微粒吸附而共沉淀，排出清液，残渣用焙烧法回收汞、或再制成汞盐。

　　铬酸洗液失效，浓缩冷却后加高锰酸钾粉末氧化，用砂芯漏斗滤去二氧化猛后即可重新使用。废洗液用废铁屑还原残留的Cr(IV)到Cr(Ⅲ)，再用废碱中和成低毒的Cr(OH)3沉淀。

　　含砷废液加入氧化钙，调节pH 为8，生成砷酸钙和亚砷酸钙沉淀。或调节pH10 以上，加入硫化钠与砷反应，生成难熔、低毒的硫化物沉淀。

　　含铅、镉废液，用消石灰将pH调至8~10，使Pb2+ 、Cd2+ 生成Pb(OH)2和Cd(OH)2沉淀，加入硫酸亚铁作为共沉淀剂。

　　(三)有机溶剂的回收

　　废乙醚溶液置于分液漏斗中，用水洗一次，中和，用0.5% 高锰酸钾洗至紫色不褪，再用水洗，用0.5%~1% 硫酸亚铁铵溶液洗涤，除去过氧化物，再用水洗，用氯化钙干燥、过滤、分馏、收集33.5~ 34.5℃ 馏分。

　　乙酸乙酯废液先用水洗几次，再用硫代硫酸钠稀溶液洗几次，使之褪色，再用水洗几次，蒸馏，用无水碳酸钾脱水，放置几天，过滤后蒸馏，收集76~77℃ 馏分。

　　氯仿、乙醇、四氯化碳等废溶液都可以通过水洗废液再用试剂处理，最后通过蒸馏收集沸点左右馏分，得到可再用的溶剂。方法可在有关资料上查到。

　　(四)废料销毁

　　实验中出现的固体废弃物不能随便乱放，以免发生事故。如能放出有毒气体或能自燃的危险废料不能丢进废品箱内和排进废水管道中。不溶于水的废弃化学药品禁止丢进废水管道中，必须将其在适当的地方烧掉或用化学方法处理成无害物。碎玻璃和其他有棱角的锐利废料，不能丢进废纸篓内，要收集于特殊废品箱内处理。

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