主题：【求助】求助：MDQ毛细管电泳电流前十分钟电流不稳定。但是十分钟后就平缓了。是怎么回事儿？

原文由 nini2006(nini2006) 发表:

很正常，样品区和缓冲溶液区的溶液性质不一样，电导率不同，需要有一段时间去平衡。前面的峰是溶剂峰，也是很常见，只要不影响分离，不必介怀。

原文由 瀛台寂(v2772193) 发表:
年前做实验一直是好好的

但是年后回来就出现了这个问题

在做之前我拿甲醇，Hcl，NaOH又重新再生过一次。然后昨天和今天做了四次实验。都是电流在前十分钟呈跳跃式阶梯式上升。然后大约十分钟后电流就稳定了。这到底是怎么回事儿啊？做了四次电流的规律都是这个样子啊。

而且如果只是单纯的在两级加电压。电流不会这样上升。会在很短的时间内上升到正常电流。

好苦恼啊。

求大神解答啊。

然后会在十分钟那块会有吸收峰。样品的吸收峰预计应该是在五十分钟左右才会出啊。

原文由 CEcret(v2812644) 发表:
1.柱活化不用HCl,因为对处理硅羟基没帮助。只用NaOH,然后水，然后buffer.
2.buffer冲洗时间要足够长，如果你的毛细管在水冲洗以后用buffer冲洗不够，就会出现电流上升的情况。

原文由 ericwong(ericwong) 发表:

原文由 CEcret(v2812644) 发表:
1.柱活化不用HCl,因为对处理硅羟基没帮助。只用NaOH,然后水，然后buffer.
2.buffer冲洗时间要足够长，如果你的毛细管在水冲洗以后用buffer冲洗不够，就会出现电流上升的情况。

赞同第二条。进样品之前，一定要用buffer长时间冲洗，尤其是PBS，绝对不能冲洗20分钟就完事。

原文由 瀛台寂(v2772193) 发表:

原文由 ericwong(ericwong) 发表:

原文由 CEcret(v2812644) 发表:
1.柱活化不用HCl,因为对处理硅羟基没帮助。只用NaOH,然后水，然后buffer.
2.buffer冲洗时间要足够长，如果你的毛细管在水冲洗以后用buffer冲洗不够，就会出现电流上升的情况。

赞同第二条。进样品之前，一定要用buffer长时间冲洗，尤其是PBS，绝对不能冲洗20分钟就完事。

二十分钟？我从来都没有冲洗过那么长时间啊。我一般就是缓冲5~7分钟就完事儿了。

最经做实验分离葡萄糖和果糖时，会出来三条吸收峰。然后我就单独分离了下葡萄糖和果糖。果糖是正常的，但是葡萄糖会出来两条峰。

最近很愁这个情况。

有人说可能是在衍生的时候出现了葡萄糖的同分异构体。也说缓冲液的ph值可能会有影响。这个缓冲时间会有影响吗。

个人觉得出现葡萄糖的同分异构体的可能性比较大。但是不知道怎么去验证这个结果啊。

原文由 瀛台寂(v2772193) 发表:

原文由 ericwong(ericwong) 发表:

原文由 CEcret(v2812644) 发表:
1.柱活化不用HCl,因为对处理硅羟基没帮助。只用NaOH,然后水，然后buffer.
2.buffer冲洗时间要足够长，如果你的毛细管在水冲洗以后用buffer冲洗不够，就会出现电流上升的情况。

赞同第二条。进样品之前，一定要用buffer长时间冲洗，尤其是PBS，绝对不能冲洗20分钟就完事。

二十分钟？我从来都没有冲洗过那么长时间啊。我一般就是缓冲5~7分钟就完事儿了。

最经做实验分离葡萄糖和果糖时，会出来三条吸收峰。然后我就单独分离了下葡萄糖和果糖。果糖是正常的，但是葡萄糖会出来两条峰。

最近很愁这个情况。

有人说可能是在衍生的时候出现了葡萄糖的同分异构体。也说缓冲液的ph值可能会有影响。这个缓冲时间会有影响吗。

个人觉得出现葡萄糖的同分异构体的可能性比较大。但是不知道怎么去验证这个结果啊。