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主题：【已应助】蛋白质液相色谱出峰差

浏览0 回复6 电梯直达
撒旦之吻
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发表于：2014/02/25 17:19:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近在用LC-MS做一个分子量27kDa的蛋白质药物，C18，300A的柱子，流动相是0.2%的甲酸（乙酸）和含0.2%甲酸（乙酸）的乙腈，峰型拖尾严重，且在柱子中残留也很厉害，梯度洗脱0-0.5min：30%有机相；0.5-6min：30-95%有机相；6-11min：95%有机相‘11-12min：95-30%有机相，最后平衡5min，请问各位大神有什么办法能让色谱峰不拖尾，且不让药物在柱中残留呢？不想用TFA，对质谱污染比较严重！谢谢啊！
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2014/2/25 18:00:41 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
出峰时间早不？早的话易峰型拖尾的。呵呵
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撒旦之吻
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2014/2/25 18:48:53 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ie4680180(ie4680180) 发表:

出峰时间早不？早的话易峰型拖尾的。呵呵


嗯，我试试换一换梯度
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hujiangtao
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2014/2/26 9:14:45 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是物质有些偏碱性？
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八杯水
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2014/2/26 9:33:49 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主你这个方法是参考标准的还是自己摸索的？
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撒旦之吻
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2014/2/26 9:51:40 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
把有机相起始比例调低了，保留时间延长了，峰型好很多了
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ie4680180
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2014/2/26 11:04:59 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
嗯，有机相起始比例可以调到5%。呵呵
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