主题：【求助】为什么毛细管电泳电流持续稳定降低？

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wy20071722

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2014/11/29 11:38:48 21楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 chenhua_zhang(v2636203) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 chenhua_zhang(v2636203) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 chenhua_zhang(v2636203) 发表:
原文由 gabyg(v2716616) 发表:
做Beckman毛细管电泳仪器校验，按照《JJG 964-2001 毛细管电泳仪检定规程》检定：

波长254nm ，75μm × 40c m毛细管，柱温25℃，电泳电压为15 kV。选择气压8 kPa，进样时间3s(气压进样)。用20 mmol/L的磷酸氢二钠作为缓冲液，取质量浓度为2 X 10-6 g/ml的维生素B6溶液进样。

校验用的毛细管有一年没用了，用之前活化了一下。电流图如上，电流持续降低，波动，然后又会陡然升至正常电流40μA。还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。

后来买了新毛细管，结果还是这样。

对毛细管还不太了解，请教大家这是怎么回事？

楼主你好，我们实验室的beckman MDQ P/ACE 的仪器有同样的问题，困扰有半个月了。不知道楼主的问题解决没有？

目前我们发现，换毛细管，加电压不进样，都不能解决这个电流问题。

总的来说，一天中前几针的电流时稳定的，连续使用就会出现上述问题。仪器之前放置了有6年没有使用，所以。。。

谢谢
每次进样前按一下程序冲一冲柱子试试：氢氧化钠-水-buffer （2-3min）

加电压前都是5min 0.1M NaOH 5min H2O 5min 20mM pH7.0 phosphate buffer
很久不用的仪器是会有很多问题的，电极清洗过了吗？用棉花蘸酒精把电极擦一擦。

电极清洗过，而且新的电极都换过。比较奇怪的是，仪器停一天，电流能正常。连着用就不行了，现在想把它卸了，里面看看。

看了长长的回复。首先仪器停一天电流就能正常，说明跟时间有关系。那你可以试试：

1.要是等到电流不正常了，马上关了仪器再开，运行一针电流还正常吗？

2.保持电流正常的那个条件，等到电流不正常的时候，把水、碱、缓冲液、小瓶都换一遍电流还正常吗？

3.等到电流不正常了，马上把管子在重新活化一遍，电流还正常吗？

4.要是上面都没有效果，可能仪器、卡盒、毛细管的安装是有问题的，检查一下是不是有漏液什么的这种会随时间积累变化的问题存在。

总体上讲，我认为仪器还是比较稳定的，能有电流正常的时候，那说明仪器是没有问题的，可能的问题就是安装、毛细管和溶液。出现这种问题，主要的方法就是“换”：无论是毛细管、溶液还是操作条件，推测哪里有问题，就把那里换成好的，看看是不是能解决问题。我们也只能凭经验给你提供参考，帮助你更快找到问题。加油！

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2014/11/29 11:40:28 Last edit by wy20071722