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SPE固相萃取
SPE C18固相萃取小柱 6ml 500mg
1.活化
6ml色谱甲醇过柱，滴速为宜。
2.平衡
6ml去离子水过柱，滴速为宜，当水液面要比填料上表面高1mm左右，再上样。
3.上样
取上图第四步离心后的上清液过C18小柱，滴速为宜。过柱前上清液要利用1%乙酸调节pH至2.5-3.0之间。
4.淋洗
5%甲醇溶液，6ml淋洗过柱，去除杂质。抽干
5.洗脱
用2-4倍柱床体积的95%色谱甲醇洗脱。
这是我初步想的方法，用来进行ABA前处理，之后准备在进行一系列操作进行HPLC检测。但是有几个问题
1.活化用的甲醇浓度一般是多少？
2.关于提取剂，我查了文献有的说可以利用80%甲醇进行浸提。有的说利用改进的Bieleski混合液（甲醇:甲酸：水=15:1:4，v/v/v），这个Bieleski里面用的甲醇和甲酸是百分之多少的？
3.再就是淋洗这一步，我测定的植物激素是利用反相萃取方法，淋洗为了把干扰物质洗去，应该用多少的甲醇呢？我的ABA溶解在80%的甲醇中。
4.最后洗脱，用的甲醇浓度多少呢？
希望来人解答万谢！！很急的
原文由 疯狂的麦子(v2906572) 发表:
RTSPE固相萃取
SPE C18固相萃取小柱 6ml 500mg
1.活化
6ml色谱甲醇过柱，滴速为宜。
2.平衡
6ml去离子水过柱，滴速为宜，当水液面要比填料上表面高1mm左右，再上样。
3.上样
取上图第四步离心后的上清液过C18小柱，滴速为宜。过柱前上清液要利用1%乙酸调节pH至2.5-3.0之间。
4.淋洗
5%甲醇溶液，6ml淋洗过柱，去除杂质。抽干
5.洗脱
用2-4倍柱床体积的95%色谱甲醇洗脱。
这是我初步想的方法，用来进行ABA前处理，之后准备在进行一系列操作进行HPLC检测。但是有几个问题
1.活化用的甲醇浓度一般是多少？
2.关于提取剂，我查了文献有的说可以利用80%甲醇进行浸提。有的说利用改进的Bieleski混合液（甲醇:甲酸：水=15:1:4，v/v/v），这个Bieleski里面用的甲醇和甲酸是百分之多少的？
3.再就是淋洗这一步，我测定的植物激素是利用反相萃取方法，淋洗为了把干扰物质洗去，应该用多少的甲醇呢？我的ABA溶解在80%的甲醇中。
4.最后洗脱，用的甲醇浓度多少呢？
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