XX年X月X日,某地一位村民因孩子考上大学,在家中宴请亲朋好友,参加宴席的村民从次日中午开始陆续出现呕吐,腹泻、发烧、全身疼痛等症状,疑似食物中毒。第三日,疑似食物中毒样本3份食品5份粪便送至实验室。根据病人临床症状和流行病调查初步诊断为细菌性食物中毒。经过实验室检测和原因调查分析,确认本次事件是由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒事件,现将实验室检测结果报告如下。
1 样品来源 样品由某地县疾控中心采集,3份食品标本,5份粪便标本。
2 试剂和仪器 含225ml缓冲蛋白胨水均质袋,四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液,亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液,亚硫酸铋(BS)琼脂,木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂,三糖铁(TSI)琼脂,均购自广东环凯微生物科技有限公司。VITEK鉴定卡GN卡购自法国梅里埃公司,沙门氏菌属诊断血清购自宁波天润生物药业有限公司。拍击式均质器,全自动微生物鉴定和药敏分析系统VITEK2。
3 细菌分离鉴定 将3份食品各称取25g加入含225ml缓冲蛋白胨水均质袋,用拍击式均质器拍打2min;粪便标本接种于含10ml缓冲蛋白胨水增菌管中,将增菌袋和增菌管都放置于36℃±1℃培养箱培养8-18h,轻轻摇动培养过的混合液,移取1ml接种到10ml四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液,42℃±1℃培养18-24h,同时再移取1ml接种到亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液,36℃±1℃培养18-24h,分别用接种环取增菌液1环,划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板,于36℃±1℃培养18-24h。沙门氏菌属在BS琼脂平板和XLD琼脂平板上的菌落特征见表1.
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自琼脂平板上挑取3-5个可疑菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再与底层穿刺;同时划线BS琼脂平板和XLD琼脂平板进行纯培养。沙门氏菌属在三糖铁琼脂管的反应结果见表2.
结果:取纯培养平板上的菌落配置菌悬液,填充GN卡,通过VITEK2鉴定为沙门氏菌属,最后用三糖管进行血清学鉴定为肠炎沙门氏菌。检出肠炎沙门氏菌的标本为食品中的 凉拌猪肉。5份粪便标本均检出肠炎沙门氏菌。![]()
增菌用的含225ml缓冲蛋白胨水均质袋
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TTB增菌管
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SC增菌管
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TTB与SC增菌管阳性标本反应管(有2个阴性的了,可以作为对照,呵呵)
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BS琼脂平板上的菌落
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三糖铁琼脂 阳性标本反应管
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VITEK 2 (这家伙用的比较熟练了,自己认为还是比较好的。原来听有人说不怎么样,)
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VITEK2 鉴定报告 沙门氏菌属
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鉴定用的血清, 138种的,三盒装。