主题:【讨论】如何正确选择和使用液相保护柱

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夏天的雪
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在分析色谱柱之前连接保护柱可以防止分析色谱柱被一些微粒物质堵塞,以及强吸附组分在色谱柱上吸附,造成色谱柱污染。液相保护柱价格相对较低,可以进行清洗,还能延长色谱柱的使用寿命,因此受到使用者的青睐。液相保护柱在选择的时候及在日常使用过程中有哪些需要注意的地方?欢迎各抒己见
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有水有渝
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保护柱最好与当前所接的色谱柱填料一致,粒径与孔径比分析柱略小。
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夏天的雪
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
保护柱最好与当前所接的色谱柱填料一致,粒径与孔径比分析柱略小。
填料一致是否就是C18对应C18,NH2对应NH2,有没有改性过需要考虑吗?粒径和孔径小是为了更好的吸附颗粒杂质?
fiyingwing
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基本上都是使用分析柱相同填料粒径完全相同的保护柱。柱子一般使用一年/3w针,使用两根保护柱。

ps.曾有同事尝试过C18的保护柱NH2的分析柱,结果出现双头峰。
推测可能是因为两种不同保留基体不匹配造成的。实际效果不如在线过滤器。
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夏天的雪
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基本上都是使用分析柱相同填料粒径完全相同的保护柱。柱子一般使用一年/3w针,使用两根保护柱。

ps.曾有同事尝试过C18的保护柱NH2的分析柱,结果出现双头峰。
推测可能是因为两种不同保留基体不匹配造成的。实际效果不如在线过滤器。
保护柱的填料和色谱柱的填料需要是一个品牌的吗
fiyingwing
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基本上都是使用分析柱相同填料粒径完全相同的保护柱。柱子一般使用一年/3w针,使用两根保护柱。

ps.曾有同事尝试过C18的保护柱NH2的分析柱,结果出现双头峰。

推测可能是因为两种不同保留基体不匹配造成的。实际效果不如在线过滤器。
保护柱的填料和色谱柱的填料需要是一个品牌的吗


我们单位3.5μm4.5μm粒径的分析柱就用第三方通用的型的保护柱,这种保护柱有2.5μm、3.5μm两种颗粒大小,类型有C18和氨基柱。

UPLC的分析柱就只能用原厂的保护柱了。和分析柱一样的填料。
夏天的雪
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基本上都是使用分析柱相同填料粒径完全相同的保护柱。柱子一般使用一年/3w针,使用两根保护柱。

ps.曾有同事尝试过C18的保护柱NH2的分析柱,结果出现双头峰。

推测可能是因为两种不同保留基体不匹配造成的。实际效果不如在线过滤器。
保护柱的填料和色谱柱的填料需要是一个品牌的吗


我们单位3.5μm4.5μm粒径的分析柱就用第三方通用的型的保护柱,这种保护柱有2.5μm、3.5μm两种颗粒大小,类型有C18和氨基柱。

UPLC的分析柱就只能用原厂的保护柱了。和分析柱一样的填料。
保护柱在使用中有什么注意事项呢?如何清洗?
有水有渝
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基本上都是使用分析柱相同填料粒径完全相同的保护柱。柱子一般使用一年/3w针,使用两根保护柱。

ps.曾有同事尝试过C18的保护柱NH2的分析柱,结果出现双头峰。

推测可能是因为两种不同保留基体不匹配造成的。实际效果不如在线过滤器。
保护柱的填料和色谱柱的填料需要是一个品牌的吗


我们单位3.5μm4.5μm粒径的分析柱就用第三方通用的型的保护柱,这种保护柱有2.5μm、3.5μm两种颗粒大小,类型有C18和氨基柱。

UPLC的分析柱就只能用原厂的保护柱了。和分析柱一样的填料。
保护柱在使用中有什么注意事项呢?如何清洗?


粒径与孔径至少不能比分析柱大,大就起不到较好的保护作用了,什么性质填料的保护柱直接与后面接的分析柱一起清洗就行了,无须单独处理,当然保护柱失效后的特殊处理除外。
雾非雾
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fiyingwing
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基本上都是使用分析柱相同填料粒径完全相同的保护柱。柱子一般使用一年/3w针,使用两根保护柱。

ps.曾有同事尝试过C18的保护柱NH2的分析柱,结果出现双头峰。

推测可能是因为两种不同保留基体不匹配造成的。实际效果不如在线过滤器。
保护柱的填料和色谱柱的填料需要是一个品牌的吗


我们单位3.5μm4.5μm粒径的分析柱就用第三方通用的型的保护柱,这种保护柱有2.5μm、3.5μm两种颗粒大小,类型有C18和氨基柱。

UPLC的分析柱就只能用原厂的保护柱了。和分析柱一样的填料。
保护柱在使用中有什么注意事项呢?如何清洗?


按我的理解,保护柱的最佳模式应该是和分析柱一样的填料与粒径,可以在色谱柱前端遇到一些强保留杂质和意外/非意外的杂质颗粒时起到李代桃僵的效果。(堵了只要换保护柱就行,而大颗粒大多是未过滤的样品,样品变质沉降或者是在流动相中溶解度低的析出盐)

大部分的分析柱使用一段时间后柱子前端一般会沉积杂质,久了已后柱压上升柱效下降。

保护柱价格低廉,使用一段时间后或在压力过高出问题的时候换掉,有效的延长了分析柱的使用寿命。

使用保护柱也不能使分析柱寿命无限延长,色谱柱只要有使用,就一定会有柱流失,到了一定程度柱效也会达不到要求。只是好的色谱柱寿命会长一些。

概括的说,保护柱确实可以有效的保护色谱柱,阻挡各因素柱子堵塞对分析柱的伤害。保留住强保留杂质,延长色谱柱使用寿命。但填料流失造成的柱效损失即使使用保护柱也同时存在。

保护柱是好用,但是用不用也是个问题?HPLC的那种换芯保护柱怎么也要一千多软妹币,UPLC的就更贵了。如果分析柱价格本身不高的话,可能还不如买两根分析柱换着用呢。
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夏天的雪
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如果色谱柱长期在酸性或碱性条件下使用是不是也需要考虑保护柱柱芯的耐酸碱性
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