最近我用20mM乙酸铵和乙腈甲醇（3:1）做流动相时，很好的分离了标准品，但第二天做却做不出来，峰走样厉害。

对比了它们的压力，发现前者是很有规律的随梯度变化而变化，后者完全没有体现出梯度变化来，几乎是平的，到快结束时才突然落了一半。还有一针发现压力突然跳到0后又恢复正常的情况。

考虑仪器问题，但是别人没有这种情况
那是我操作或者乙酸铵的问题吗？？？

大家多多多指教！不胜感激！！！

推荐答案：rendong1018回复于2014/10/10

2种原因：
1是仪器，在线混合有问题或是某个泵有问题；
2是你的盐和有机相是分开的，而在混合中出现了问题，试试将盐和有机相混合高、低比例后，再采用梯度。
希望对你有所帮助。

补充答案：

夏天的雪回复于2014/10/10

可以检查比例阀和泵，两者都可能造成压力不稳。可以走单流动相或等度进行判断

hujiangtao回复于2014/10/11

待测物质要是对pH值敏感的话影响还是挺大的

sukiliang回复于2014/10/11

楼主有没有保存压力曲线图啊？发上来看看

ll001回复于2014/10/29

仪器在线混合有问题，另外你的盐和有机相是分开的，而在混合中出现了问题。

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2014/10/10 22:42:08 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 rendong1018(rendong1018) 发表:
2种原因：
1是仪器，在线混合有问题或是某个泵有问题；
2是你的盐和有机相是分开的，而在混合中出现了问题，试试将盐和有机相混合高、低比例后，再采用梯度。
希望对你有所帮助。

谢谢你，文献上也是这样子的，我是为了避免麻烦才分开了，明天做做试试！

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夏天的雪

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2014/10/10 22:45:50 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以检查比例阀和泵，两者都可能造成压力不稳。可以走单流动相或等度进行判断

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2014/10/10 22:46:29 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 茜草科(v2942906) 发表:
原文由 rendong1018(rendong1018) 发表:
2种原因：
1是仪器，在线混合有问题或是某个泵有问题；
2是你的盐和有机相是分开的，而在混合中出现了问题，试试将盐和有机相混合高、低比例后，再采用梯度。
希望对你有所帮助。

谢谢你，文献上也是这样子的，我是为了避免麻烦才分开了，明天做做试试！

对了，这跟PH有关吗，调了PH以后，柱压浮动挺大，
还有个奇怪的现象就是我的紫外一直下降，负三四百这样子，但是成功分离的那次也是这样子，不明白为什么紫外会下浮这么厉害。

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2014/10/10 22:49:45 Last edit by v2942906