主题：【第七届原创】话说四元低压梯度洗脱的优势与缺陷

话说四元低压梯度洗脱的优势与缺陷

    现在我们面对的样品复杂多样、千奇百怪，那我们检测这些样品所涉及到的仪器和方法也就多种多样各不相同了。比如很多混合化合物检测就得采用梯度洗脱的方式才能更准确、方便、快速的检测出来。然而梯度洗脱方法也有很多种，现在一般采用的有二元低压梯度洗脱、二元高压梯度洗脱、三元低压梯度洗脱、四元低压梯度洗脱、四元高压梯度洗脱，戴安还高调的推出一款双三元高压梯度洗脱等等，其中二元高压梯度与四元低压梯度应用的最为盛行。

    这两种仪器在市场上都很多，各有优缺点。现在中国的国标中应用的仪器及方法最多也就用到二元梯度，四元梯度还没有具体国标方法。有的人可能认为买一套四元梯度没用，买二元的就足够了，买四元的纯粹是浪费钱和资源。其实不然，四元的有四元的优势。下面就一一说来听听。

   

    四元低压梯度洗脱不用说就是能同时走四种流动相，而且在不同时间下可以以任意比例走。它是由一台高压泵和一个四元比例阀组成的，通过程序控制比例阀来实现梯度洗脱。它的优势是只有一个泵，比二元高压梯度泵省一个泵，比四元高压梯度泵省三个泵，大大节省了实验仪器费用。四元低压梯度需要的高压泵少，那么该仪器的故障率相对也就少。一般情况下四元低压梯度洗脱时泵的流速不变，这样控制泵的脉动就容易的多，仪器的噪声小检出限也就低；一般的液相泵流速越小脉动越大，通常总流速都是1.0ml/min，这样的流速脉动很小、流速很稳。四元低压梯度和二元低压梯度相比只是比例阀一个是四元的一个是二元的，费用相差并不大，但除了日常梯度用的二元外，剩下的二元一元可以走过渡液（换流动相时不相容或有较剧烈反应等两种多多种流动相时，如含量较高的甲醇和含量较高的缓冲液相容可能会有盐结晶析出；含量较高的甲醇和含量较高的酸溶液相容可能会产生大量热量，甚至有较剧烈的反应等，损坏仪器甚至发生危险），反相色谱一般是5%-20%的甲醇水溶液，通常大家都选10%；另一元可以走纯甲醇等试剂，这样冲洗系统时非常方便，不用来回换流动相瓶，既能省时、提高效率又能省试剂、省费用。当然它也有不足的地方，那就是低压混合的流动相进入高压系统容易产生气泡，所以一般的四元低压泵都会加一个在线脱气机（这个和高压泵相比一般都不算贵）；它的混合是在高压泵之前，从混合处开始到进样阀的管路都是混合体积，虽然混合会很充分，但混合体积也会很大，混合滞后时间较长；四元低压梯度由于低压混合和混合体积较大等因素，它的准确度没有二元高压梯度高，但能满足绝大多数梯度洗脱要求。



    二元高压梯度洗脱是由两台高压泵同时走两种流动相，可以在不同时间下以任意比例走。它的优势是高压混合不容易产生气泡（相对四元低压梯度）；混合体积较小；混合准确度较高等。缺陷是价格较高；故障率较高；冲洗系统时需要经常换流动相瓶，相对麻烦；泵流速小时有时会产生较大的压力（流速）脉动，影响仪器的检出限等。



    总之四元低压梯度洗脱和二元高压梯度洗脱都能实现现有梯度洗脱要求，只是使用过程和结果各不相同，各有优缺点。

    四元低压梯度价格便宜，梯度混合噪声小，故障率小，使用方便等优点是我所看好的，相比我更支持四元低压梯度洗脱。长期从事液相色谱分析的您呢？您的看法和我有多大的差别呢？您更看好那种洗脱方式呢？