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主题：【求助】分光光度法做曲线请教

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bkxgr712
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发表于：2014/10/24 16:28:29 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：10积分 状态： 已解决
职业卫生作业场所空气中，分光光度法测定毒物。我们紫外一般用A-A0和浓度（含量）做曲线，原吸一般用A直接做曲线，现请教一个问题，A-A0和A 两种方式做曲线是不是都可以？是什么原理？或者什么情况下采用什么方式更科学？忘指教，新手，勿喷！
推荐答案：老兵回复于2014/10/24
应该采用A-A0并将0浓度参与回归的方法。
  因为减去A0是希望消除试验方法固定偏倚对校准曲线的影响，当用校准曲线来估计未知样的浓度时，要考虑到试样的 测量吸光度也会受到固定偏倚影响，如果校准曲线和试样测定过程中出现的偏倚一样，偏倚是无需校正的，可有时两者 的操作往往不是同时同批进行的，如由于时间或批次不同， 固定偏倚有所变化，那么两者的吸光度就要做不同的校正。 即在每批分析时带空白， 并对相应的信号进行校正。
  试验证明加零回归的校准曲线与不加零回归校准曲线比较，两者的r和b值均无差异， 但加零回归校准曲线截距a 的绝 对值明显变小，因此在作校准曲线的回归计算时必须先A-A0先后再加零回归，使回归线接近原点。
补充答案：

sdlzkw007回复于2014/10/24

A-A0是不是空白扣减,严格意义上来说,空白必须扣减，有些仪器在软件中会有相应的功能，手动计算不能重复扣除。直接

使用吸光度来做曲线拟合，前提是空白不要扣减（小到可以忽略），个人观点，仅供参考

尘回复于2014/10/24

应为一般原吸的空白极小，几乎为0，所以就直接做。而分光光度法的空白都是加了显色剂的，都是有数值的，所以要扣

lq0010回复于2014/10/25

分光光度法分析标准曲线，要求是减去空白进行拟合的
如果不减空白，在后续数据处理上需要注意到减去空白这个问题

tjssg回复于2014/10/25

一般都用A-A0做标准曲线，原因老兵已经回答！

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sdlzkw007
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2014/10/24 16:56:03 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
A-A0是不是空白扣减,严格意义上来说,空白必须扣减，有些仪器在软件中会有相应的功能，手动计算不能重复扣除。直接

使用吸光度来做曲线拟合，前提是空白不要扣减（小到可以忽略），个人观点，仅供参考
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yangjiqing2005
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2014/10/24 19:05:11 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做曲线时应该都扣除空白吧，测量时可扣可不扣，我们都是这么做的
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尘
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2014/10/24 19:36:47 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应为一般原吸的空白极小，几乎为0，所以就直接做。而分光光度法的空白都是加了显色剂的，都是有数值的，所以要扣
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尘
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2014/10/24 19:47:57 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其实原吸显示的吸光度就是扣了空白后的
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老兵
wangliqian
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2014/10/24 22:58:46 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该采用A-A0并将0浓度参与回归的方法。
  因为减去A0是希望消除试验方法固定偏倚对校准曲线的影响，当用校准曲线来估计未知样的浓度时，要考虑到试样的 测量吸光度也会受到固定偏倚影响，如果校准曲线和试样测定过程中出现的偏倚一样，偏倚是无需校正的，可有时两者 的操作往往不是同时同批进行的，如由于时间或批次不同， 固定偏倚有所变化，那么两者的吸光度就要做不同的校正。 即在每批分析时带空白， 并对相应的信号进行校正。
  试验证明加零回归的校准曲线与不加零回归校准曲线比较，两者的r和b值均无差异， 但加零回归校准曲线截距a 的绝 对值明显变小，因此在作校准曲线的回归计算时必须先A-A0先后再加零回归，使回归线接近原点。
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lq0010
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2014/10/25 9:53:09 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分光光度法分析标准曲线，要求是减去空白进行拟合的
如果不减空白，在后续数据处理上需要注意到减去空白这个问题
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tjssg
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2014/10/25 16:33:21 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般都用A-A0做标准曲线，原因老兵已经回答！
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袖手苍溪
v2953147
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2014/10/28 19:07:30 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么我提不了问题?是不是新来的有积分,时间的要求?
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玲儿响叮当
jshbhh
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2014/10/29 14:43:22 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 袖手苍溪(v2953147) 发表:为什么我提不了问题?是不是新来的有积分,时间的要求?
提出悬赏问题需要积分支持，普通提问没积分要求的吧。
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wfuse001
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2014/11/28 14:45:30 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很多仪器可以自动扣减空白的。
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