水样稀释及培养:
1、按无菌操作法,将水样作10倍系列稀释:
2、根据对水样污染情况的估计,选择2-3个适宜稀释度(饮用水如自来水、深井水等,一般选择1、1:10两种浓度;水源水如河水等,比较清洁的可选择1:10、1:100、1:1000三种稀释度;污染水—被选择1:100、1:1000、1:10000三种稀释度),吸取1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作3个重复。
3、将熔化后保温度45℃的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平皿,每皿约15mL,并趁热转动平皿混合均匀。
4、待琼脂凝固后,将平皿倒置于37℃培养箱内培养24±1h后取出,计算平皿内菌落数目,乘以稀释倍数,即得1mL水样中所含的细菌菌落总数。
稀释度的选择:
1、应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以该稀释倍数
2、若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30-300之间,则视二者之比如何来决定。若其比值小于2,应报告其平均数;若比值大于2,则报告其中较小的数字
3、若所有稀释度的平均菌落均大于300,则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数
报告之
4、若所有稀释度的平均菌落数均小于30、则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数
5、若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数
6、若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间,则以最接近30或300的平均菌落数乘以该稀释倍数