表1 2种文献衍生化方法比较
文献 | BP2010 Metronidazole Intravenous Infusion | 甲硝唑注射液中亚硝酸盐测定 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
重氮化试剂 | 3.3g/L 对氨基苯磺酸,以冰醋酸-水为溶剂,溶解性好。溶液为淡黄色。 | 10g/L 对氨基苯磺酸,以盐酸-水为溶剂,溶解性好。溶液为淡黄色。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
偶联试剂 | 3.3g/L 8-氨基萘磺酸,以冰醋酸-水为溶剂,超生2h,未完全溶解。溶液为紫红色。 | 1g/L N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐 ,以水为溶剂,超生5min,可完全溶解。溶液为浅橙色。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
衍生试液放置颜色变化 | 放置7天后对氨基苯磺酸溶液仍为淡黄色,8-氨基萘磺酸溶液渐变为暗紫红色。 | 放置7天后对氨基苯磺酸溶液仍为淡黄色,N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶液为仍浅橙色。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
衍生物的稳定性 | 亚硝酸钠衍生后的溶液放置,用HPLC的方法测定其峰面积:
结果表明:20h亚硝酸钠衍生溶液峰面积减少,表明其衍生化物不稳定。 | 亚硝酸钠衍生后的溶液放置,分别用UV和HPLC的方法测定其吸光度和峰面积:
结果表明:8h内亚硝酸钠衍生溶液吸光度和峰面积无明显变化,表明其衍生化物稳定。 |
表2 加衍生试液的量
加衍生试液1ml | 加衍生试液2ml | 加衍生试液3ml | |
先加对氨基苯磺酸试液 | 1ml | 2ml | 3ml |
再加各加N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐试液 | 1ml | 2ml | 3ml |
表3 衍生时间和衍生试剂耐用性
衍生时间 | 吸光度 | HPLC峰面积 | 衍生试剂 | 吸光度 | HPLC峰面积 |
30min | 0.412 | 288162 | 1ml | 0.401 | 284265 |
60min | 0.410 | 289840 | 2ml | 0.410 | 289840 |
90min | 0.409 | 286145 | 3ml | 0.416 | 288714 |
RSD(%) | 0.37(n=3) | 0.52(n=3) | RSD(%) | 1.85(n=3) | 1.02(n=3) |