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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】样品稀释液与流动相不一致会产生溶剂峰实例分享

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一片枫叶
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发表于：2014/12/09 14:39:20 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于高效液相色谱分析样品的溶解与流动相的选择至关重要，除了遵循一般的流动相的选择之外，我们应该还要注意：用流动相稀释样品而不用吸光度比流动相强的溶剂稀释。

下面的色谱图还隐藏着一些话题，分析讨论还能发现什么问题呢？

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2014/12/9 15:00:51 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般和初始流动相一致
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2014/12/9 16:02:18 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得，稀释液和流动相极性尽量保持一致。但是有时候样品用流动相溶解有困难，需要更换溶剂，这时候也要尽量选择极性与流动相接近的稀释剂。若极性相差太大，会导致保留时间和峰形的改变。甲醇/水=1/4和乙腈/水=1/4极性相差不太大，所以可能图谱体现不出太大差别。若用纯甲醇或乙腈做稀释液，估计峰形和保留时间会有很大变化
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我是风儿
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2014/12/9 19:08:35 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如何判断溶剂的极性呢
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一片枫叶
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2014/12/9 19:58:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 我是风儿(nphfm2009) 发表:

如何判断溶剂的极性呢


上图反映了以下几个问题：1：乙腈和甲醇两种流动相中，检出峰的高度不同。原因：在波长相同的情况下，甲醇的吸光强度比乙腈的吸光强度大，因而，在以甲醇做流动相时，检出峰的高度比乙腈做流动相时变低。2：乙腈和甲醇两种流动相中，检出峰的保留时间不同。原因：甲醇的极性比乙腈大，在反相色谱分析中，极性越小洗脱能力越强，样品出峰时间越短，因而，在以乙腈做流动相时，检出峰的保留时间比甲醇做流动相时小。3：吸光度大的的溶剂（甲醇）稀释样品，在吸光度小的流动相（乙腈）中，溶剂峰显示更突出（图二）。原因：甲醇的吸光度比乙腈大。

极性大小：甲醇 >乙腈
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2015/5/19 19:03:14 Last edit by v2960432
一片枫叶
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2014/12/9 20:04:35 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wslmpol(wslmpol) 发表:

我觉得，稀释液和流动相极性尽量保持一致。但是有时候样品用流动相溶解有困难，需要更换溶剂，这时候也要尽量选择极性与流动相接近的稀释剂。若极性相差太大，会导致保留时间和峰形的改变。甲醇/水=1/4和乙腈/水=1/4极性相差不太大，所以可能图谱体现不出太大差别。若用纯甲醇或乙腈做稀释液，估计峰形和保留时间会有很大变化


若用纯甲醇或乙腈做稀释液，要考虑溶剂在流动相中的扩散效应，会使溶剂峰显示更加突出。
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2014/12/9 20:07:14 Last edit by v2960432
一片枫叶
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2014/12/9 20:10:23 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:

一般和初始流动相一致


是的，不一致的情况，很难得到很好的效果，溶剂峰更为突出。
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2015/5/19 19:05:06 Last edit by v2960432
手机版： 样品稀释液与流动相不一致会产生溶剂峰实例分享
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