主题:【原创】影响液相色谱仪ELSD检测性能的基本因素

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    蒸发光散射检测器(ELSD)是一种通用型的检测器,虽然开发应用时间不长,但已被广泛应用于液相色谱仪的碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测分析中。作为影响蒸发光散射检测器检测效果的主要因素有漂移管温度、流动相组成及流速、载气性质及流速等。漂移管温度对基线水平和噪声的影响没有明显规律。温度升高,流动相蒸发趋向完全,信噪比提高,但温度太高会使流动相沸腾,增加背景噪声,同时可能导致溶质部分汽化,使信号变小,降低信噪比。如果温度太低,流动相蒸发不完全,基线水平提高。故最优温度应为在流动相(包括其中所含的盐)基本挥发的基础上,产生可接受噪声的最低温度是最为理想的状态。

流动相的挥发性越好,方法的灵敏度越高。流动相缓冲盐的挥发性、纯度及浓度将直接影响ELSD检测的基线水平、基线漂移程度及噪声大小。用作缓冲盐的盐,既要容易挥发(一般是热分解挥发),又要具有较高的纯度。通常使用的缓冲盐由乙酸、甲酸、三氟乙酸、硝酸铵、磷酸氢二铵等组成。

在一定范围内,液相色谱仪流动相的流速越低,流动相完全挥发所需的载气流速越低,形成的溶质颗粒越大,对激光散射能力越强,相应的信号越强。当载气流速太小时,流动相挥发不完全,增加背景噪声,降低信噪比。最优载气流速应是在可接受噪声的基础上,产生最大检测响应值时的最低流速。

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夏天的雪
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冰块
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楼主的主要观点都是正确的,ELSD检测条件的优化方向也很合理,但是有两点我觉得在实际工作中有两点需要注意的。
第一,缓冲盐中提到的硝酸铵和磷酸氢二铵我觉得在蒸发光检测器中要慎用,因为这两种盐的彻底挥发还是比较困难的,尤其在目前市场上的产品以低温型蒸发光为主,对这两种缓冲盐的挥发就更加困难了。如果在仪器内部出现残留造成的损伤也比较大。
第二,关于降低流速提高信号响应的问题,蒸发光近似于质量型检测器峰面积与样品进样质量相关而降低流速实际上一般会使得峰高降低而峰型展宽。准确的说在相同的进样浓度下,使用窄柱并同时降低液路流速和气路流速(需优化)可获得优于常规柱的信号响应高度。
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