主题:【讨论】CE-SDS condition曲线不正常

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nini2006
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帮你贴出来了,其实就是点击图片图标,然后点击“上传图片”选择图片,选择好了以后再点击一下图片,图片就自动出现在编辑框里面了。注意图片不能太大。
nini2006
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从你贴出来的图来看,除了基线稍有抬高和最起始阶段谱图有些许波动之外,前后并没什么不太对的地方。你要知道,即使是同一个人,每次/每天配的buffer都会有误差,这些误差也会直接导致谱图的些许变化。再者,电泳初始阶段是需要时间平衡的,这个平衡包括仪器的平衡和毛细管内各种电化学反应的平衡,在未达到平衡前会发生各种细微变化也是在所难免。再退一万步讲,如果你的毛细管有换过,毛细管的批次、每次处理毛细管的细微差别、还有药品批次的不同都会导致实验结果的细微差别。但是,只要误差还在可接受范围内(化学分析方法是小于0.1%,色谱法貌似可以适当放宽到0.3%,具体可以去翻一下大学分析化学课本),即使是谱图有比较明显的差别都可以不用理会的。

简言之,你这情况只要不影响分离误差也在可接受范围内,建议你就不要再纠结啦~
wy20071722
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原文由 lingyou(v2983592) 发表:
换了新管子,condition情况有改善,但是仍然跟以前的曲线不完全一致。测试样品的时候发现前几分钟基线还是明显波动。除了新毛细管新缓冲液,我还可以改变什么条件呢??
主要是这两个方面的,再就考虑下操作细节方面有没有不合理的地方。我想管子和溶液不是简单的更换那么简单,因为:管子的批次不同会有影响;溶液即使是同时配制的,使用的过程中受环境的影响也可能会有不同,最好使用比较稳定的缓冲溶液。
lingyou
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原文由 nini2006(nini2006) 发表:
从你贴出来的图来看,除了基线稍有抬高和最起始阶段谱图有些许波动之外,前后并没什么不太对的地方。你要知道,即使是同一个人,每次/每天配的buffer都会有误差,这些误差也会直接导致谱图的些许变化。再者,电泳初始阶段是需要时间平衡的,这个平衡包括仪器的平衡和毛细管内各种电化学反应的平衡,在未达到平衡前会发生各种细微变化也是在所难免。再退一万步讲,如果你的毛细管有换过,毛细管的批次、每次处理毛细管的细微差别、还有药品批次的不同都会导致实验结果的细微差别。但是,只要误差还在可接受范围内(化学分析方法是小于0.1%,色谱法貌似可以适当放宽到0.3%,具体可以去翻一下大学分析化学课本),即使是谱图有比较明显的差别都可以不用理会的。

简言之,你这情况只要不影响分离误差也在可接受范围内,建议你就不要再纠结啦~
因为是刚开始接触毛细管和相关的实验,很多东西不了解。所以想尽量做到完美,明白每个问题出现的原因和解决办法。现在是熟悉阶段就放宽要求的话,怕以后真的形成标准了结果波动会更大。毛细管是一个盒里的同一根截出来的,处理都是按照贝克曼的condition方法,试剂盒也是同一批的两盒都试过,然后仪器时间也不长。我纠结的就是为什么重现不出来以前的基线,以前做了一段时间基线都是没问题的。可能我还是没有接受毛细管就是这么随性这个现实吧~~以前用液质偏差是很小很小的~~
lingyou
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原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
主要是这两个方面的,再就考虑下操作细节方面有没有不合理的地方。我想管子和溶液不是简单的更换那么简单,因为:管子的批次不同会有影响;溶液即使是同时配制的,使用的过程中受环境的影响也可能会有不同,最好使用比较稳定的缓冲溶液。
管子是同一根截出来的,缓冲液是贝克曼的成品试剂盒,试了同一批的两个盒。操作呢都是按照仪器带的方法没有改动。实验室有空调室温变化不大。真的不知道还有哪有问题啦!
lingyou
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原文由 nini2006(nini2006) 发表:
帮你贴出来了,其实就是点击图片图标,然后点击“上传图片”选择图片,选择好了以后再点击一下图片,图片就自动出现在编辑框里面了。注意图片不能太大。
好的!谢谢!
CEcret
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我只能告诉你,第一张图的基线是正常的结果。第二张图,如果你换了毛细管还是这样的基线,请考虑sample buffer或者 Gel Buffe被污染的可能。
lingyou
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原文由 CEcret(v2812644) 发表:
我只能告诉你,第一张图的基线是正常的结果。第二张图,如果你换了毛细管还是这样的基线,请考虑sample buffer或者 Gel Buffe被污染的可能。
你是说condition图是正常的?但是后换的buffer都是新开封的,应该不存在污染的可能性吧~~那我再开一瓶新的Gel Buffer试试,sample buffer暂时没有了
CEcret
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原文由 lingyou(v2983592) 发表:
你是说condition图是正常的?但是后换的buffer都是新开封的,应该不存在污染的可能性吧~~那我再开一瓶新的Gel Buffer试试,sample buffer暂时没有了
我不看condition的图,我说的是分离的图谱
lingyou
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原文由 CEcret(v2812644) 发表:
我不看condition的图,我说的是分离的图谱


第一个图谱是正常的,跟贝克曼资料里一样。我贴condition的图是因为我发现分离图谱基线不正常的时候,condition都跟资料里有不同。
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