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主题：【已应助】基线怎么会是这个样子？

浏览0 回复16 电梯直达
huht3000
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发表于：2015/03/16 19:34:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

色谱柱：Waters Xbridge 4.6*250mm,5um
流动相：A：20mM (NH4)2HPO4 (氨水调pH8.5）-MeOH=85：15
              B：ACN
梯度：时间      0          10        20        30        35
          A        100        80        50        35        35
          B          0          20        50        65        65
怎么解决？我曾用异丙醇冲洗过整个系统，但还是如此，换了柱子和仪器也是一样
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2015/3/16 20:13:06 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
等度跑基线，基线也会漂移这么严重？
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huht3000
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2015/3/16 20:15:33 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊


原文由 wajer(anwiner) 发表:
等度跑基线，基线也会漂移这么严重？
等度没试过，怎么个等度，跟乙腈随便一个比例走等度吗？

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2015/3/16 20:30:15 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 huht3000(huht3000) 发表:
你这个方法是新摸索的？等度的意思是不改变流动相的比例，然后看看基线是否漂移得那么严重
该帖子作者被版主 v2960432加 2积分， 2经验，加分理由：参与讨论
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2015/3/16 20:32:24 Last edit by anwiner
一片枫叶
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2015/3/16 20:49:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在整个过程中，存在着极性的突变，吸光度突变。
在20分钟以前，流动相主要是甲醇的缓冲盐，当乙腈逐渐混入时，由于在此波长下，乙腈的吸光度低于流动相的紫外吸收本底，因此出现了波动峰和往下漂移。
20分钟以后，流动相的主要成分为乙腈，那么，甲醇的缓冲盐即变为在此波长和紫外吸收本底下的杂质，由于甲醇在此流动相下，紫外吸收不同，便出现了甲醇缓冲盐的波动峰。
这种方式好像是不会出现基线稳定的。
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2015/3/16 21:09:06 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
在整个过程中，存在着极性的突变，吸光度突变。
在20分钟以前，流动相主要是甲醇的缓冲盐，当乙腈逐渐混入时，由于在此波长下，乙腈的吸光度低于流动相的紫外吸收本底，因此出现了波动峰和往下漂移。
20分钟以后，流动相的主要成分为乙腈，那么，甲醇的缓冲盐即变为在此波长和紫外吸收本底下的杂质，由于甲醇在此流动相下，紫外吸收不同，便出现了甲醇缓冲盐的波动峰。
这种方式好像是不会出现基线稳定的。
虽然我不懂，但是分析得有条有理
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2015/3/16 21:09:29 Last edit by anwiner
一片枫叶
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2015/3/16 21:14:20 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wajer(anwiner) 发表:
虽然我不懂，但是分析得有条有理
也可能有不足之处，有待于进一步讨论
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lostking2008
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2015/3/17 7:06:39 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果试剂纯度没有问题，检测器波长可能不是最佳。
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夏天的雪
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2015/3/17 8:56:51 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
漂移的比较厉害，应该是走梯度的原因，继续优化色谱条件吧
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huht3000
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2015/3/17 19:44:31 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢各位的解释，我再试试不用甲醇的条件吧，估计这个条件想走好不容易
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一片枫叶
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2015/3/17 20:19:36 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 huht3000(huht3000) 发表:
谢谢各位的解释，我再试试不用甲醇的条件吧，估计这个条件想走好不容易
如果选梯度洗脱的话最好选同种有机溶剂不同浓度的梯度洗脱，这样可能基线比较容易稳定。
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